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求是zrl

银虫 (小有名气)

[求助] 请问:发酵生产氨基葡萄糖的可行性。跪求!!!

请问各位大侠。老板让我设计实验筛选发酵生产氨基葡萄糖的菌株,我也查了好多这方面的资料,仍然糊里糊涂,有以下几个问题向各位大侠请教,还望不吝赐教啊!
1、以葡萄糖为碳源发酵生产氨基葡萄糖这一思路是否可行啊?再微生物体内,氨基葡萄糖是菌体合成肽聚糖时的一种中间产物,阻断了其代谢途径,菌体还能生长吗?
2、氨基葡萄糖的代谢途径是:少量的葡萄糖(2%~5%)→6-磷酸葡萄糖→6-磷酸果糖,然后在6-磷酸果糖转氨酶(GFAT)催化下,以谷氨酰胺提供氨基,生成6-磷酸葡萄糖胺,这一步骤是葡萄糖胺代谢的限速步骤。6-磷酸葡萄糖胺生成后,立即经乙酰化生成N-乙酰-6-磷酸葡萄糖胺,再转化成多种核苷酸糖。
请问:可不可以阻断6-磷酸氨基葡萄糖的乙酰化反应,直接磷酸化后释放到细胞外部,从而使氨基葡萄糖得以在细胞外积累?这样的话细胞就无法合成细胞壁了,细胞是不是就不能生长繁殖了呢?这样做还有没有意义呢?
如果这一思路不可行,还有其他的方法么?
谢谢!
注:氨基葡萄糖又叫葡糖胺。
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-18 19:55:20
1. 你可以参考一下国外文献
2. 老师要你筛选出发菌株,这个不知道你想通过在自然界筛选?诱变?基因工程?想好了方式吗?
3. 你说的阻断途径可以,但是不一定完全阻断,完全可以弱化这个酶基因
4. 你的产品非得做成胞外产物吗?
微生物发酵
2楼2012-05-18 19:40:39
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flightty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以肯定的告诉你,发酵法生产完全是可行的,国内不论是学校还是企业都有开发,一些企业早在10年前已经产业化生产
6楼2012-05-19 08:32:57
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 求是zrl at 2012-05-20 13:11:10:
感谢应助!
国外文献中没有查到这方面的文章;只是筛选出发菌株,老板并没有提出具体的方法,只是说了思路……阻断代谢途径的思路可行吗?一旦阻断,微生物就不能合成细胞壁了,其他的与细胞壁相关的途径不久收 ...

阻断代谢途径的思路肯定可行,但是工作量大,在诱变筛选方面可以筛选渗漏型菌株,在基因工程方面通过定点诱变弱化这个酶,两种都可以.
微生物发酵
9楼2012-05-20 13:45:22
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yfzhang2008

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是弱化,不是阻断,同时要强化6磷酸果糖向6磷酸葡萄糖胺转化的合成酶
国外有相关的报道,并已经产业化
佛祖对每个人都是公平的
10楼2012-05-21 11:00:20
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求是zrl

银虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by johnny4890 at 2012-11-08 21:13:21
你好,你的氨基葡萄糖现在做出来了吗?

现在还在筛菌呢,不过已经筛出一株类似的了……你也做这块吗?
有的才能放矢!!
14楼2012-11-09 09:04:21
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普通回帖

liuguilin

禁言 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献


这个基本上很难!
3楼2012-05-18 20:13:36
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4楼2012-05-18 20:24:46
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

查英文文献吧。你老板的思维肯定也是某次会议得到的。。。如果从未报道。难度有点大
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
5楼2012-05-18 20:39:00
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dengchun14

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个太困难了,你筛选菌种估计三年不一定能筛出来!
世界上最遥远的距离,就是你在拍写真照片,而我在拍电镜照片。
7楼2012-05-19 17:21:59
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求是zrl

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hkfgwww at 2012-05-18 19:40:39:
1. 你可以参考一下国外文献
2. 老师要你筛选出发菌株,这个不知道你想通过在自然界筛选?诱变?基因工程?想好了方式吗?
3. 你说的阻断途径可以,但是不一定完全阻断,完全可以弱化这个酶基因
4. 你的产品非得 ...

感谢应助!
国外文献中没有查到这方面的文章;只是筛选出发菌株,老板并没有提出具体的方法,只是说了思路……阻断代谢途径的思路可行吗?一旦阻断,微生物就不能合成细胞壁了,其他的与细胞壁相关的途径不久收影响了吗?不管是那种方法,我想首先确定一下这种筛选/育种的思路对不丢啊!

谢谢!劳烦您帮忙分析一下,不胜感激!
有的才能放矢!!
8楼2012-05-20 13:11:10
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