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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请问流动相加入缓冲盐之后怎样冲柱子？
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红豆西米

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问流动相加入缓冲盐之后怎样冲柱子？

我的流动相是乙酸铵和甲醇，我一般用纯水和甲醇做流动相的时候，都是先用90:10水：甲醇，最后用10:90水：甲醇冲，然后保存。现在流动相换成乙酸铵和甲醇了，应该怎样冲柱子？
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1楼 2012-02-27 16:03:07
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dreamsnow200428

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还是先用高水相冲洗，过度到最后换成纯有机相即可
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2楼2012-02-27 16:11:07
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闫帅-----

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该5%甲醇水冲洗就可以，感觉盐加的不少可以多冲会。
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3楼2012-02-27 16:11:15
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以——
1：9（甲醇：水），0.5ml/min冲40min
改用9:1（甲醇：水），0.5ml/min冲40min
然后保存
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守候在风中的宁静。
4楼2012-02-27 16:28:14
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红豆西米

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-27 16:28:14:
可以——
1：9（甲醇：水），0.5ml/min冲40min
改用9:1（甲醇：水），0.5ml/min冲40min
然后保存

有人建议说先用90:10水：甲醇冲1h，再用50:50水：甲醇20min，最后10:90水：甲醇30min以上，我想请问50:50不是会使柱压升高吗？我的是C18柱
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5楼2012-02-27 16:51:41
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
soundhorizo(金币+1): 感谢专业指导 ^^ 2012-02-28 12:35:10
引用回帖:
5楼: Originally posted by 红豆西米 at 2012-02-27 16:51:41:
有人建议说先用90:10水：甲醇冲1h，再用50:50水：甲醇20min，最后10:90水：甲醇30min以上，我想请问50:50不是会使柱压升高吗？我的是C18柱

1、50:50时粘度相对较大，压力会偏高，但通常还在耐受范围内
2、流速设置0.5，所以压力也不会太高
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守候在风中的宁静。
6楼2012-02-27 16:55:32
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liuwei10987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 感谢指导 ^^ 欢迎常来 2012-02-28 12:35:34
我一般是这样冲的：
梯度：
时间    水     甲醇
0          90       10
30        90        10
40        0          100
流速：视压力而定，一般ID2.1mm,0.2ml/min
                      ID4.6mm，1ml/min
                                 ID10mm,4ml/min
                                 ID21.5mm,16ml/min
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7楼2012-02-27 18:13:43
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果柱子过了缓冲盐，就要多花点时间冲柱子了，如果柱子当天没有冲洗好的话，那么以后再想冲洗好就很困难了。所以楼主尽量多冲一会吧
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8楼2012-02-27 20:24:47
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winnie的爱

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们平常因为色谱柱是一直在用的所以基本都是10%的甲醇冲柱子，有盐的也是一样的，我个人习惯是冲90min。要长期保存柱子的话，再冲60min的高比例有机相
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9楼2012-02-28 08:59:49
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liudimei

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在用高水相冲柱洗的时间也可以延长啊，看你的流动相里含盐多的话就冲洗久一点，然后可以多设几个梯度过度到高有机相冲洗就好，
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学习交流
10楼2012-02-28 09:58:06
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