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请问流动相加入缓冲盐之后怎样冲柱子?
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红豆西米
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请问流动相加入缓冲盐之后怎样冲柱子?
我的流动相是乙酸铵和甲醇,我一般用纯水和甲醇做流动相的时候,都是先用90:10水:甲醇,最后用10:90水:甲醇冲,然后保存。现在流动相换成乙酸铵和甲醇了,应该怎样冲柱子?
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1楼
2012-02-27 16:03:07
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dreamsnow200428
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还是先用高水相冲洗,过度到最后换成纯有机相即可
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2楼
2012-02-27 16:11:07
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应该5%甲醇水冲洗就可以,感觉盐加的不少可以多冲会。
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2012-02-27 16:11:15
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可以——
1:9(甲醇:水),0.5ml/min冲40min
改用9:1(甲醇:水),0.5ml/min冲40min
然后保存
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4楼
2012-02-27 16:28:14
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楼
:
Originally posted by
痴夷子皮
at 2012-02-27 16:28:14:
可以——
1:9(甲醇:水),0.5ml/min冲40min
改用9:1(甲醇:水),0.5ml/min冲40min
然后保存
有人建议说先用90:10水:甲醇冲1h,再用50:50水:甲醇20min,最后10:90水:甲醇30min以上,我想请问50:50不是会使柱压升高吗?我的是C18柱
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5楼
2012-02-27 16:51:41
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痴夷子皮
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soundhorizo(金币+1): 感谢专业指导 ^^ 2012-02-28 12:35:10
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5楼
:
Originally posted by
红豆西米
at 2012-02-27 16:51:41:
有人建议说先用90:10水:甲醇冲1h,再用50:50水:甲醇20min,最后10:90水:甲醇30min以上,我想请问50:50不是会使柱压升高吗?我的是C18柱
1、50:50时粘度相对较大,压力会偏高,但通常还在耐受范围内
2、流速设置0.5,所以压力也不会太高
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6楼
2012-02-27 16:55:32
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soundhorizo(金币+1): 感谢指导 ^^ 欢迎常来 2012-02-28 12:35:34
我一般是这样冲的:
梯度:
时间 水 甲醇
0 90 10
30 90 10
40 0 100
流速:视压力而定,一般ID2.1mm,0.2ml/min
ID4.6mm,1ml/min
ID10mm,4ml/min
ID21.5mm,16ml/min
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7楼
2012-02-27 18:13:43
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如果柱子过了缓冲盐,就要多花点时间冲柱子了,如果柱子当天没有冲洗好的话,那么以后再想冲洗好就很困难了。所以楼主尽量多冲一会吧
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2012-02-27 20:24:47
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我们平常因为色谱柱是一直在用的所以基本都是10%的甲醇冲柱子,有盐的也是一样的,我个人习惯是冲90min。要长期保存柱子的话,再冲60min的高比例有机相
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9楼
2012-02-28 08:59:49
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liudimei
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在用高水相冲柱洗的时间也可以延长啊,看你的流动相里含盐多的话就冲洗久一点,然后可以多设几个梯度过度到高有机相冲洗就好,
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10楼
2012-02-28 09:58:06
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