应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA后，反转录后用β-actinpcr很多条带
212/3返回列表上一页123下一页
查看: 2504  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

上官慧

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by friya0910 at 2012-05-17 13:28:35:
我大概明白了你的意思了，你的第一条亮带就是在marker200的那个应该就是你的目的带啊，其它的应该是非特异性扩增，最下面糊的那条是引物二聚体，你这不叫没P出来，你这明明就是P出来了啊，只是引物特意性不好，至 ...

阴性对照是想验证一下提的rna有没有基因组dna，加了rna也不会p出来才对呀~
赞一下 回复此楼
11楼2012-05-17 16:27:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 上官慧 at 2012-05-17 16:27:28:
阴性对照是想验证一下提的rna有没有基因组dna，加了rna也不会p出来才对呀~

按理说应该P不出来的，如果要看有没有DNA污染的话最好在内含子区设计一段引物去P，如果能P出来就说明有DNA污染了！
赞一下 回复此楼
12楼2012-05-17 16:33:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by friya0910 at 2012-05-17 16:33:25:
按理说应该P不出来的，如果要看有没有DNA污染的话最好在内含子区设计一段引物去P，如果能P出来就说明有DNA污染了！

谢谢啦~
回复此楼
13楼2012-05-17 16:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 上官慧 at 2012-05-17 12:07:23:
反转录之后没有定量，应该怎么定量呢？50ul的体系，加1ul的模板。模板浓度0.1ug/ul

没定量怎么算出来的 模板浓度？
赞一下 回复此楼
14楼2012-05-17 17:28:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-05-17 17:28:30:
没定量怎么算出来的 模板浓度？

反转录试剂盒上写的，total rna用2ug最后体积是20ul，得出模板浓度时0.1ug/ul
赞一下 回复此楼
15楼2012-05-17 18:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核, 鼓励应助 2012-05-18 15:35:23
无论你的体系有没有污染，你的引物质量是不合格的。重新设计引物吧，你的引物二聚体很严重，设计的时候着重注意，NAC有条带说明你的RNA有基因组污染，下次做个NTC阴性对照
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

上官慧
16楼2012-05-17 18:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-05-17 18:36:36:
无论你的体系有没有污染，你的引物质量是不合格的。重新设计引物吧，你的引物二聚体很严重，设计的时候着重注意，NAC有条带说明你的RNA有基因组污染，下次做个NTC阴性对照

不好意思，我想问一下NAC和NTC是什么呢？NTC怎么做呢
赞一下 回复此楼
17楼2012-05-18 09:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 上官慧 at 2012-05-18 09:01:17:
不好意思，我想问一下NAC和NTC是什么呢？NTC怎么做呢

推荐你看个帖子http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4318668
赞一下 回复此楼
18楼2012-05-18 10:48:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-18 15:35:42
[1]你的目的条带应该是出来的
[2]但是你的引物特异性不太好，换个引物吧。。。
赞一下 回复此楼
自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
19楼2012-05-18 14:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)
求一条经典的β-actin引物，用于cDNA的鉴定。
赞一下 回复此楼
20楼2012-05-23 10:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 上官慧 的主题更新
212/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 5/250 2026-09-29 09:52 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 09:24 by JzYBbHIXWSrW
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 09:18 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:34 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:18 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:28 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭