应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA后，反转录后用β-actinpcr很多条带
52/1返回列表
查看: 2388  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)

[求助] 提取RNA后，反转录后用β-actinpcr很多条带

反转录很多次，用的是takara的反转录试剂盒。用β-actin都没p出来。β-actinpcr后条带很多，在目的条带处阴性对照跟基因组dna都pcr出来了。很是郁闷，请各位虫友帮忙解决~~

这是我提的rna

这是我β-actin的结果，第一个是阴性没加反转录酶的rna。β-actin产物在c



[ Last edited by 上官慧 on 2012-5-17 at 09:26 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2012-05-17 09:18:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by friya0910 at 2012-05-17 16:33:25:
按理说应该P不出来的，如果要看有没有DNA污染的话最好在内含子区设计一段引物去P，如果能P出来就说明有DNA污染了！

谢谢啦~
回复此楼
13楼2012-05-17 16:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

friya0910

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-17 14:41:11
actin出那么多带可能是你的引物特异性不好，或者是不是你的模版被污染了啊？还有你的说明不是很明白，按理说阴性的话应该是没有带的，你的却出带了，很有可能是你的模版被污染了！
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-17 10:02:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官慧

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by friya0910 at 2012-05-17 10:02:18:
actin出那么多带可能是你的引物特异性不好，或者是不是你的模版被污染了啊？还有你的说明不是很明白，按理说阴性的话应该是没有带的，你的却出带了，很有可能是你的模版被污染了！

是几次反转录的cDNA用作模板都是这个结果，目标条带是211bp，用的marker是DL500.模板是翻转后就用了，按说也没什么机会污染的。
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-17 10:12:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 上官慧 at 2012-05-17 10:12:02:
是几次反转录的cDNA用作模板都是这个结果，目标条带是211bp，用的marker是DL500.模板是翻转后就用了，按说也没什么机会污染的。

Marker最亮的带是多大啊？
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-17 10:29:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 6/300 2026-08-17 14:02 by EYK67XJMj64E
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 6/300 2026-08-17 13:58 by EYK67XJMj64E
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 13:49 by EYK67XJMj64E
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 8/400 2026-08-17 12:45 by a441914426
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 13/650 2026-08-17 12:33 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭