应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取动物组织RNA时的处理
52/1返回列表
查看: 2163  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ljapril

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取动物组织RNA时的处理

我要从小鼠脑部的海马提取RNA，现在组织已经有了，放在1.5ml的EP管中，只有一点点，提取RNA时需要充分研磨破碎，我们这里只有细胞超生破碎仪，那么我这种情况可以用吗?
一是超生破碎放热，会影响RNA吗？
二是探头该怎么处理啊？用DEPC水冲洗？会不会很容易污染样品？
三是大概要破碎多久呢？设定的参数最好是多少啊？怎么判断破碎充分了呢？
问题有点多，谢谢大家了！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2012-05-16 22:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by ljapril at 2012-05-23 23:54:38:
我试了用加液氮研磨，发现组织变得好硬，不好磨啊

肯定是要费些力气的呀，不过研磨的还是比较充分的，要加完液氮立即研磨。祝成功啊！
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
11楼2012-05-24 07:44:53
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-17 14:45:14
ljapril: 金币+1 2012-07-19 10:25:21
没有用超声破碎过动物组织，破碎过大肠杆菌。不清楚用超声能不能破碎，应该用液氮研磨比较好。要是可以用超声的话，可以把ep管放在冰上。与组织接触的仪器部分都要认真处理吧，要不会是RNA降解的。
祝好运啊！
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
2楼2012-05-17 08:43:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-17 14:45:25
ljapril: 金币+2 2012-07-19 10:25:33
脑部？应该是很容易裂解的组织。加入Trizol后用枪反复吸打多次即可裂解。可见组织均匀分散在Trizol里即已裂解，也可在吹散后静置上5-10min确保裂解。
超声也不是不可以，但相对来说麻烦。且超声放热多少对RNA有些影响。且如是接触式的探头，容易引入污染。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
3楼2012-05-17 09:01:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljapril

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by karin at 2012-05-17 08:43:48:
没有用超声破碎过动物组织，破碎过大肠杆菌。不清楚用超声能不能破碎，应该用液氮研磨比较好。要是可以用超声的话，可以把ep管放在冰上。与组织接触的仪器部分都要认真处理吧，要不会是RNA降解的。
祝好运啊！

1.5的EP管怎么放液氮进去啊？组织就那么一点点，也不好取出来啊
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-17 11:50:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭