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geniusrkx

铁杆木虫 (小有名气)

才虫

[求助] sybrgreen I 和sybrgreen Ⅱ 有什么区别呢?

我做的是底栖动物的DNA,想做一下琼脂糖凝胶电泳,因为考虑到EB的毒性,所以换成了sybrgreen I染料,听说sybrgreen I 是双链的,sybrgreen  Ⅱ 是单链的,不知道会不会对我的实验有影响。
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xmuring

木虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
geniusrkx: 金币+2, 有帮助 2012-05-19 09:15:28
SYBR Green I一般用来染双链DNA,它是嵌在DNA螺旋的小沟里面,价格便宜;SYBR GreenII一般用来染单链DNA和RNA,结合原理我也不大清楚,就知道它价格比较贵,我有次用SYBR Green II染了质粒DNA跑电泳,效果还是挺好的,就是比较浪费……你内个用I应该就可以了吧
2楼2012-05-18 20:10:21
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
geniusrkx: 金币+1, 有帮助 2012-05-19 09:15:35
那你可以考虑不用EB,用Gold View染料啊,也挺好用的
3楼2012-05-18 20:15:11
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

SYBR Green I 染料是一种直接与双链 DNA (dsDNA) 结合的荧光染料,是荧光定量 PCR 最常用的 DNA 结合染料。在定量 PCR 中,SYBR Green I 可与双链 DNA(dsDNA)非特异性 结合后发出荧光,则可以通过检测反应体系中的 SYBR Green I 荧光强度,达到检测 PCR 产
物扩增量的目的。游离状态下,SYBR Green I 发出微弱的荧光,一旦与 dsDNA 结合,其荧 光增加 1000 倍,一个反应发出的全部荧光信号与出现的 dsDNA 量成比例,且会随扩增产 物的增加而增加;所以通过检测 PCR 反应液中的荧光信号强度,可以对目的基因进行准确
定量,同时还可以测定扩增的目的 DNA 片段的熔解温度。们实验室用BIODAI测得的扩增曲线起跳值一般在30左右,每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。
4楼2020-04-21 14:17:15
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