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geniusrkx铁杆木虫 (小有名气)
才虫
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sybrgreen I 和sybrgreen Ⅱ 有什么区别呢？
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| 我做的是底栖动物的DNA，想做一下琼脂糖凝胶电泳，因为考虑到EB的毒性，所以换成了sybrgreen I染料，听说sybrgreen I 是双链的，sybrgreen Ⅱ 是单链的，不知道会不会对我的实验有影响。 |
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SYBR Green I 染料是一种直接与双链 DNA (dsDNA) 结合的荧光染料，是荧光定量 PCR 最常用的 DNA 结合染料。在定量 PCR 中，SYBR Green I 可与双链 DNA（dsDNA）非特异性 结合后发出荧光，则可以通过检测反应体系中的 SYBR Green I 荧光强度，达到检测 PCR 产 物扩增量的目的。游离状态下，SYBR Green I 发出微弱的荧光，一旦与 dsDNA 结合，其荧 光增加 1000 倍，一个反应发出的全部荧光信号与出现的 dsDNA 量成比例，且会随扩增产 物的增加而增加；所以通过检测 PCR 反应液中的荧光信号强度，可以对目的基因进行准确 定量，同时还可以测定扩增的目的 DNA 片段的熔解温度。们实验室用BIODAI测得的扩增曲线起跳值一般在30左右，每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。 |
4楼2020-04-21 14:17:15