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清扬-314

新虫 (初入文坛)

[求助] 跑电泳

我今天做的RT-PCR,跑出来的电泳图是这样的,我的样本DNA在孔里面出不来,marker和阳性对照都出来了,这是怎么回事,可是孔里面如果是杂质的话,为什么是亮带呢?非常感谢回帖,谢谢!
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执着
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-15 15:25:42
引用回帖:
3楼: Originally posted by damaomao at 2012-05-15 09:12:32:
怎末获得的目的条带 目的条带多大  对照是什么

目的片段大小是多少不知道,PCR怎么做呢?反应条件随便设的吗?另外,阳性对照也不是很理想,引物二聚体那么多,扩增效率很低啊?做PCR的功课没预习好呢!
4楼2012-05-15 10:19:57
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叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助,很热心哦 2012-05-15 15:25:12
[1]首先,你的阳性(B-ACTIN)和你的MARKER 跑出来,电泳胶以及电泳本身没有问题;
[2]我不知道你的目的条带是多大。。。。如果比阳性大很多,实话说那你的阳性不太适合,你可以再找个与你目的基因接近的阳性来做
[3]样品本身有问题,即你的PCR溶液里面有一个大家一样的溶液有问题,不然不会是所有样品都是这样的。。。。
自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
2楼2012-05-15 06:42:31
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damaomao

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

3楼2012-05-15 09:12:32
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llbrood

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by holyala at 2012-05-15 10:19:57:
目的片段大小是多少不知道,PCR怎么做呢?反应条件随便设的吗?另外,阳性对照也不是很理想,引物二聚体那么多,扩增效率很低啊?做PCR的功课没预习好呢!

引物不就20bp左右吗,是因为二聚体空间构想不规整所以会跑到100bp处吗?
5楼2012-05-17 10:48:08
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