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清扬-314

新虫 (初入文坛)

[求助] 跑电泳

我今天做的RT-PCR,跑出来的电泳图是这样的，我的样本DNA在孔里面出不来，marker和阳性对照都出来了，这是怎么回事，可是孔里面如果是杂质的话，为什么是亮带呢？非常感谢回帖，谢谢！
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执着
1楼 2012-05-14 20:18:31
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叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，很热心哦 2012-05-15 15:25:12
[1]首先，你的阳性（B-ACTIN）和你的MARKER 跑出来，电泳胶以及电泳本身没有问题；
[2]我不知道你的目的条带是多大。。。。如果比阳性大很多，实话说那你的阳性不太适合，你可以再找个与你目的基因接近的阳性来做
[3]样品本身有问题，即你的PCR溶液里面有一个大家一样的溶液有问题，不然不会是所有样品都是这样的。。。。
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自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
2楼2012-05-15 06:42:31
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damaomao

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2012-05-15 09:12:32
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-15 15:25:42
引用回帖:
3楼: Originally posted by damaomao at 2012-05-15 09:12:32:
怎末获得的目的条带 目的条带多大  对照是什么

目的片段大小是多少不知道，PCR怎么做呢？反应条件随便设的吗？另外，阳性对照也不是很理想，引物二聚体那么多，扩增效率很低啊？做PCR的功课没预习好呢！
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4楼2012-05-15 10:19:57
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llbrood

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by holyala at 2012-05-15 10:19:57:
目的片段大小是多少不知道，PCR怎么做呢？反应条件随便设的吗？另外，阳性对照也不是很理想，引物二聚体那么多，扩增效率很低啊？做PCR的功课没预习好呢！

引物不就20bp左右吗，是因为二聚体空间构想不规整所以会跑到100bp处吗？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-05-17 10:48:08
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