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[求助]
求大家帮忙指出我实验过程中的不恰当地方 已有1人参与
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我是想做一个硅胶层析柱分离净化的加标回收实验，要看洗脱剂对样品回收的影响，分析物是弱极性的 。 （一）我的样品的标准溶液是用甲醇配的，20ppb。我的样品处理后是Hex作为溶剂的，所以我取了0.5ml的标准液于塑料试管，然后我用氮吹吹干，之后加1mlHex复溶，用涡旋混匀器涡旋1min混均，放在旁边待用。 （二 ）硅胶层析柱自填：（1）硅胶失活（之前做好的）：10g硅胶加入0.5g蒸馏水于研钵中混均，密封过夜使用。 （2)称取4g5%水的硅胶加入到15mlHex的小烧杯中，玻璃棒搅拌均匀。然后湿法装柱的，装柱前柱子加了10mlHex,自由沉降后加1cm无水硫酸钠然后用双链球压实，上样前多跑了两个个柱体积的Hex，等到快到无水硫酸钠层时上样，然后用DCM洗脱。 （三）收集好洗脱液后旋蒸近干，然后转移到一次性试管，氮吹干，之后加入0.5ml甲醇复溶，涡旋混匀器涡旋1min混均，转移到进样品，然后液质检测。 出现问题：（1）硅胶柱洗脱时跑着跑着就开裂了，感觉对回收率是不是有影响呢？ （2）上样时，我用的是一次性吸管上样的，但是每次都把无水硫酸钠冲成了斜面，不知道这对回收率会不会有影响呢？ （3）做了好几次回收率不是很高就是基本回收不回来，很不稳定，不知道哪出来问题，我在想是不是硅胶失活那步混合不均匀呢？大家知不知道硅胶失活这步的具体方法呢，我是自己摸索的。 问题比较多，希望有人能帮帮忙解决下。 |
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2楼2022-01-05 20:52:30
