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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 挑菌扩大培养提不出质粒
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Renavatio

木虫 (小有名气)

[求助] 挑菌扩大培养提不出质粒

从蓝白筛选的平板上挑取白斑扩大培养，用宝生物的试剂盒提取不出质粒
那个菌摇过了（不摇了之后菌体沉下去了）会不会影响啊？   还有就是摇菌的时候我是用的5ml的管子摇的，里面加的LB液体培养基有点多
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Undefined！
1楼 2012-05-12 10:33:32
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-14 13:43:41
我没做过蓝白斑，一般都是抗性筛选，然后需要做菌液PCR，最后才做扩大培养和小抽，基本没有什么问题。也有一次做载体构建，菌液PCR没有问题，但是扩繁后死活抽不出质粒，后来换了感受态就解决了。
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16楼2012-05-14 09:43:34
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你加完裂解液后变粘了吗？
你菌培养的时候加没加抗性？
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未来不是梦
2楼2012-05-12 11:03:36
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Renavatio

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-12 11:03:36:
你加完裂解液后变粘了吗？
你菌培养的时候加没加抗性？

加完裂解液P2是那种清亮粘稠状啊！    培养的菌是DH5α，培养基里面加了氨苄的
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Undefined！
3楼2012-05-12 11:14:44
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by Renavatio at 2012-05-12 11:14:44:
加完裂解液P2是那种清亮粘稠状啊！    培养的菌是DH5α，培养基里面加了氨苄的

你一共挑了多少个单菌落培养，都没有长吗？
你抗性没失效吧？
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未来不是梦
4楼2012-05-12 11:25:00
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