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Renavatio

木虫 (小有名气)

[求助] 挑菌扩大培养提不出质粒

从蓝白筛选的平板上挑取白斑扩大培养,用宝生物的试剂盒提取不出质粒
那个菌摇过了(不摇了之后菌体沉下去了)会不会影响啊?   还有就是摇菌的时候我是用的5ml的管子摇的,里面加的LB液体培养基有点多
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-14 13:43:41
我没做过蓝白斑,一般都是抗性筛选,然后需要做菌液PCR,最后才做扩大培养和小抽,基本没有什么问题。也有一次做载体构建,菌液PCR没有问题,但是扩繁后死活抽不出质粒,后来换了感受态就解决了。
16楼2012-05-14 09:43:34
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你加完裂解液后变粘了吗?
你菌培养的时候加没加抗性?
未来不是梦
2楼2012-05-12 11:03:36
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Renavatio

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-12 11:03:36:
你加完裂解液后变粘了吗?
你菌培养的时候加没加抗性?

加完裂解液P2是那种清亮粘稠状啊!    培养的菌是DH5α,培养基里面加了氨苄的
Undefined!
3楼2012-05-12 11:14:44
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by Renavatio at 2012-05-12 11:14:44:
加完裂解液P2是那种清亮粘稠状啊!    培养的菌是DH5α,培养基里面加了氨苄的

你一共挑了多少个单菌落培养,都没有长吗?
你抗性没失效吧?
未来不是梦
4楼2012-05-12 11:25:00
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