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怎样准确建立总黄酮的检测方法?
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金虫
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[交流]
怎样准确建立总黄酮的检测方法?
本人最近提取植物总黄酮,其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》,以芦丁作标样建立标准曲线: 精密称取芦丁25mg ,加甲醇定容至25 ml ,取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml,加含5 % NaNO2 水溶液1ml ,摇匀静置6 min ,再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ,摇匀静置6 min,再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ,用蒸馏水稀释定容至刻度,摇匀静置16 min,在480~540 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长在508 nm处,得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
但是最后经过萃取和树脂纯化后,检测结果120%以上,试过很多次,都是100%以上,请问各位高人指点一二!!!!!
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小胡0905
yiwenbin
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2012-05-10 17:45:46
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15楼
:
Originally posted by
soyjle
at 2012-05-11 09:14:16:
多酚、酚酸类物质对测定有影响,可以尝试其他方法。
参考文献:
1.周春华, 孙崇德, 李鲜. 富含绿原酸的植物中类黄酮测定方法探讨. 植物生理学通讯,2007, 43(5): 902-904
2.何书美,刘敬兰. 茶叶中总黄酮含量测 ...
谢谢 指点我看一下
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18楼
2012-05-11 13:54:46
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16楼
:
Originally posted by
小胡0905
at 2012-05-11 09:26:12:
亚硝酸钠-硝酸铝显色法测总黄酮是常用方法!
建议:1、溶液过滤后再测吸光度
2、换用其它更为专属的显色方法来测含量,多查些文献
亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法就是国标方法啊 我怀疑还是跟总黄酮中的成分有关系
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19楼
2012-05-11 13:56:17
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21楼
:
Originally posted by
fenghaiyan82
at 2012-05-11 15:06:53:
建议使用AlCl3显色体系,以HAc-NaAc为缓冲溶液。
Al(NO3)3显色法,干扰物质较多。
嗯 也我试试 谢谢你 你能不能告诉我 具体的原理 啊
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22楼
2012-05-12 13:53:45
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20楼
:
Originally posted by
xian2008
at 2012-05-11 14:36:59
由于样品未经分离纯化,样品中含有大量的原花色素等酚类物质干扰,该定量测定方法误差较大。建议换其他方法检测,例如,氯化铝-醋酸钾显色方法。
你有氯化铝-醋酸钾显色方法的具体步骤吗?
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26楼
2012-05-25 15:18:24
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30楼
:
Originally posted by
slshihao
at 2012-05-26 10:23:22
标曲相关系数多少,有超过其线性范围吗
R=0.9992 A在0.2-0.86之间啊 我打算换方法试试
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31楼
2012-05-30 23:41:45
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