应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 毕业在即，急！！！！！！
211/1返回列表
查看: 2526  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wushuwei1104

银虫 (小有名气)

[交流] 毕业在即，急！！！！！！

本人从事分子实验，（PCR），主要是克隆一种植物中的一个酶的未知基因，先前从未有人研究过这种植物中的这个基因。之前做PCR，出来一段基因序列，经过序列相似度比对，确定是这个基因中的一段。然后，做RACE，但做了很长时间都没有东西出来，后面还要构建表达载体，做原核表达-------   哎！这不快毕业了吗！急呀！！！！！   后来跟导师交流，导师说做不出来没关系，只要工作量够了就可以毕业。  我就在想了，这个做分子的工作量怎么算呀？  整天做RACE，PCR就是不出东西，整天重复，这算工作量吗？  如果不算的话，那做分子的什么才算工作量？  我应该怎么攒这个工作量？   谢谢各位大侠帮忙@！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-05-08 10:12:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jqq1985

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 股交流 2012-05-08 14:11:29
小丹木木: , 打字错误，更正一下。鼓励交流，欢迎常来 2012-05-08 14:12:12
以前我也出现过这种拿不到全基因的情况。当时我在NCBI里面找了好几个和我这个菌亲缘性很近的全集因组测通的种，然后对比这个基因及其上下游基因的同源性。一般如果亲缘性很近，那么他们基因同源性和基因排布方式都差不多，我用已有的片段设计引物，和上下游基因内部保守序列的引物对扩，拿到了目标基因上下游序列，也没有做RACE。植物应该内含子比较多，但是也可以一试。仅供参考。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-05-08 13:27:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宇宙心灵

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-08 18:53:23
可能引物设计存在问题，我以前做过从一株粘红酵母里面拉出一段未知的羰基还原酶基因，引物的设计十分关键。可以尝试利用已知片段作为引物通过walking拿到更多的片段，最好做ORF分析，祝楼主顺利毕业！
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2012-05-08 16:02:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zoeye

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-09 14:04:17
我看我们实验室有个人做RACE据说只要有结果 只要你会YY就能分析很多的
你可以把拿到的序列从生信方面分析下 就是所谓的预测 看看啊好写
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2012-05-09 09:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhcosa

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
RACE不出来的问题，不知道这个基因有没有表达特异性啊，比如只在某个组织中表达，在其他组织里就是扩不出来。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2012-05-09 13:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

137167741

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-09 19:13:39
工作量肯定是不好攒的，也不是做多态，微卫星什么的，所以说认真做实验才是王道。所以建议一下：
既然可以比较序列相似度，所以你就在其他物种中有这个相似的序列，那么就找那个相似度最大的来设计引物，多设计几条，然后来拉全长。
此外，因为有了部分序列，可以设计荧光定量引物，对其在不同组织，器官，部位，以及不同生长时期的表达量进行荧光定量，然后研究是表达趋势或者规律。这样做下来，那个工作量也蛮多的了。
祝你顺利毕业！
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2012-05-09 16:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

healerly

禁虫 (小有名气)
★
wushuwei1104(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
2楼2012-05-08 10:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by healerly at 2012-05-08 10:18:43:
做分子的结果容易出，但也不容易出。。。。。做分子主要是实验周期不是特别长，所以工作量的话，就听你们导师的吧，你导师不着急，你就不用着急。或者跟导师交流一下。。。。本科毕业很水的。。。。。。

我是研究僧！！！！
回复此楼
3楼2012-05-08 10:22:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackeye67

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种新基因的克隆有时候就是这样的，为了保证能克隆出来，最好手头同时做几个基因的克隆。
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-08 13:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chiden

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我还在想呢，一般的本科生论文谁着急啊。不过硕士的话，楼主建议你好好跟导师沟通沟通哦，别到时候延期就老火老
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-08 13:31:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chiden at 2012-05-08 13:31:14:
我还在想呢，一般的本科生论文谁着急啊。不过硕士的话，楼主建议你好好跟导师沟通沟通哦，别到时候延期就老火老

我可不想延期呀！！！
回复此楼
7楼2012-05-08 15:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jqq1985 at 2012-05-08 13:27:43:
以前我也出现过这种拿不到全基因的情况。当时我在NCBI里面找了好几个和我这个菌亲缘性很近的全集因组测通的种，然后对比这个基因及其上下游基因的同源性。一般如果亲缘性很近，那么他们基因同源性和基因排布方式都 ...

我跟老师交流过了，老实说不出来没关系，只要工作量够了就可以毕业。眼看就要毕业了，这做分子整天重复PCR，工作量怎么证明？难道答辩的时候把实验过程中不成功的电泳图都贴上去，把测序后不对的测序单子和结果给答辩老师看吗？  简直愁死了！  怎么办呀？   就想问一问这工作量是怎么一回事？
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-08 15:17:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chiden at 2012-05-08 13:31:14:
我还在想呢，一般的本科生论文谁着急啊。不过硕士的话，楼主建议你好好跟导师沟通沟通哦，别到时候延期就老火老

我跟老师交流过了，老实说不出来没关系，只要工作量够了就可以毕业。眼看就要毕业了，这做分子整天重复PCR，工作量怎么证明？难道答辩的时候把实验过程中不成功的电泳图都贴上去，把测序后不对的测序单子和结果给答辩老师看吗？  简直愁死了！  怎么办呀？   就想问一问这工作量是怎么一回事？
赞一下 回复此楼
9楼2012-05-08 15:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by blackeye67 at 2012-05-08 13:20:50:
这种新基因的克隆有时候就是这样的，为了保证能克隆出来，最好手头同时做几个基因的克隆。

我跟老师交流过了，老实说不出来没关系，只要工作量够了就可以毕业。眼看就要毕业了，这做分子整天重复PCR，工作量怎么证明？难道答辩的时候把实验过程中不成功的电泳图都贴上去，把测序后不对的测序单子和结果给答辩老师看吗？  简直愁死了！  怎么办呀？   就想问一问这工作量是怎么一回事？
赞一下 回复此楼
10楼2012-05-08 15:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by healerly at 2012-05-08 10:18:43:
做分子的结果容易出，但也不容易出。。。。。做分子主要是实验周期不是特别长，所以工作量的话，就听你们导师的吧，你导师不着急，你就不用着急。或者跟导师交流一下。。。。本科毕业很水的。。。。。。

我跟老师交流过了，老实说不出来没关系，只要工作量够了就可以毕业。眼看就要毕业了，这做分子整天重复PCR，工作量怎么证明？难道答辩的时候把实验过程中不成功的电泳图都贴上去，把测序后不对的测序单子和结果给答辩老师看吗？  简直愁死了！  怎么办呀？   就想问一问这工作量是怎么一回事？
赞一下 回复此楼
11楼2012-05-08 15:18:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)
路过帮顶。。。
回复此楼
12楼2012-05-08 15:19:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zoeye at 2012-05-09 09:48:41:
我看我们实验室有个人做RACE据说只要有结果 只要你会YY就能分析很多的
你可以把拿到的序列从生信方面分析下 就是所谓的预测 看看啊好写

关键是RACE没结果，只是出来一个小片段，全长还木有出来。YY是什么意思？  求指教！
赞一下 回复此楼
15楼2012-05-09 10:01:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by zhcosa at 2012-05-09 13:25:35:
RACE不出来的问题，不知道这个基因有没有表达特异性啊，比如只在某个组织中表达，在其他组织里就是扩不出来。

哦，这个也有可能！ 谢谢楼主提醒！
赞一下 回复此楼
17楼2012-05-09 16:28:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 137167741 at 2012-05-09 16:42:16:
工作量肯定是不好攒的，也不是做多态，微卫星什么的，所以说认真做实验才是王道。所以建议一下：
既然可以比较序列相似度，所以你就在其他物种中有这个相似的序列，那么就找那个相似度最大的来设计引物，多设计几 ...

谢谢哥哥帮忙！！我会努力的！谢谢！！
赞一下 回复此楼
19楼2012-05-09 20:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongfang12

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也是一直RACE，就是不出来，急惨了都
赞一下 回复此楼
20楼2012-05-09 22:45:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zoeye

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by zoeye at 2012-05-09 09:48:41:
我看我们实验室有个人做RACE据说只要有结果 只要你会YY就能分析很多的
你可以把拿到的序列从生信方面分析下 就是所谓的预测 看看啊好写

额。。。。。。YY这里就是自己找理论依据支持你的结论并预测
RACE有那么难P吗
或者你查查有没有人之前做过这个 先把别人做的建个库 然后跟你自己的结果对比 虽然一条少了点 总比没有结果好吧
赞一下 回复此楼
21楼2012-05-11 10:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wushuwei1104 的主题更新
211/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 367求调剂 +3 hffQAQ 2026-04-09 3/150 2026-04-09 13:13 by gong120082
[考研] 材料调剂 +9 18815505510 2026-04-09 10/500 2026-04-09 11:46 by Sammy2
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +26 @ASDF1234 2026-04-08 27/1350 2026-04-09 10:56 by smile-未央
[考研] 299求调剂 +5 ZVVZ13 2026-04-08 5/250 2026-04-09 10:13 by 逆水乘风
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 285求调剂 +7 恶法大二的气味� 2026-04-05 10/500 2026-04-08 14:34 by zhq0425
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +12 相信必会光芒万� 2026-04-06 15/750 2026-04-07 21:22 by 乔哒哒哒
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 材料与化工371求调剂 +14 陪琳看海 2026-04-04 15/750 2026-04-06 06:59 by houyaoxu
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 数一英一274机械调剂 +5 星陨流霞 2026-04-04 6/300 2026-04-05 11:38 by arrow8852
[考研] 材料与化工306分找调剂 +23 沧海轻舟e 2026-04-02 27/1350 2026-04-04 21:52 by laoshidan
[考研] [调剂信息]085408光电信息 求调剂 总分291分数一英一 +3 iz11az 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:09 by 蓝云思雨
[考研] 359求调剂 +7 hhhhaaaa$ 2026-04-04 7/350 2026-04-04 18:49 by imissbao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭