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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 黄精多糖含量出奇高 怎么回事
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shui__lian

新虫 (初入文坛)

[求助] 黄精多糖含量出奇高 怎么回事

大家好
   
    我现在用药典方法 提取多糖 测黄精中多糖含量
    即取60度干燥恒重的生黄精粉末0.25g，精密称定，置圆底烧瓶中，加80%乙醇150ml回流提取1h，趁热滤过，残渣用80%乙醇洗涤3次，每次10ml，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水150ml，加热回流1h，趁热滤过，残渣及烧瓶用水洗涤4次，每次10ml，合并滤液与洗液，放冷，转移至250ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀
    精密吸取1ml至10ml具塞干燥试管中，加水至2ml，摇匀，在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液，至刻度，混匀，放冷后至水浴用保温10min，取出，立即置冰水浴中冷却10min，取出，以相应试剂为空白，照紫外可见分光光度计在582nm波长处测定吸光度。   
   

   我分别按上述方法提了6次样品，测得多糖含量  68%  左右。

   实在搞不懂到底哪里出了问题，使测出的多糖含量这么高。。。


   在做含量测定时，分别吸取1ml多糖液、1ml水和8ml0.2%蒽酮硫酸溶液时  都是用吸量管吸取的  这样重复性比较好
   但是就是含量出奇的高

   哪位高手指点一下

   谢啦
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1楼 2012-05-08 09:20:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mjnrhw

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2012-05-08 23:22:01
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.葡萄糖标准曲线的制作
将l000µg/mL稀释为l00µg/mL。
取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：
管号        1        2        3        4        5        6        7
葡萄糖标准液（mL）        0        0.1        0.2        0.4        0.6        0.8        1.0
蒸馏水（mL）        1        0.9        0.8        0.6        0.4        0.2        0
葡萄糖含量（µg）        0        10        20        40        60        80        100
在每支试管中立即加入蒽酮试剂5.0mL，（迅速浸于冰水浴中冷却，）各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。自水浴沸腾起计时，准确煮沸l0 min，取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。以标准葡萄糖含量（µg/ml）为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。（EXCEL作图）
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Thinkingstorm
4楼2012-05-12 10:16:39
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
shui__lian: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢龙猫2585 2012-05-14 16:53:55
这是蒽酮硫酸法的标准方法，与你的方法有一定差距，波长选定，最好是自己进行全波长扫描确定最优的；其次样品0.25g太少了，如果原料不算很贵的话，可以适当加大量；样品测定时，吸光值应该在你的标准曲线的范围内，偏高偏低都不准确；再者，不知黄精总糖含量是多少，有可能你得到的结果是总糖，标准方法不一定适合每个原料，建议将多糖醇沉一下，复溶再测定，进行比较一下...
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Thinkingstorm
5楼2012-05-12 10:28:21
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普通回帖

shui__lian

新虫 (初入文坛)
求高手  帮忙
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2楼2012-05-08 18:58:37
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yaj2233

银虫 (小有名气)
如果操作没错，计算也没错，那不用太担心，我做栀子含量测定时，药典要求是不得少于1.5%，结果测出百分之五点几
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6楼2012-05-16 18:03:51
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wzhw0417

铜虫 (正式写手)
即使反复洗涤，也还有还原糖或低聚糖在你的溶液中，所以致使你测出来的吸光值偏高，最后多糖含量提高。
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7楼2012-06-05 15:46:25
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吹风的兔子

银虫 (初入文坛)
我最近在做枸杞多糖的提取和检测。
和你一样，参考药典的方法。刚开始，测出的多糖也出奇的高，最后分析原因，应该是色素没有除干净，导致最后色素参与反应，多糖量偏高，最后，我采用乙醚除色素2次，每次2小时，乙醇2小时。
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闲暇时吹吹风
8楼2012-09-03 15:57:29
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xngajsy17

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2017-07-09 21:38:00
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dseager

新虫 (小有名气)
色素会影响含量测定，还有就是提取出来得不只是有多糖，还有单糖和寡糖，还需要醇沉一下

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10楼2017-07-24 00:44:39
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