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黄精多糖含量出奇高 怎么回事
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大家好 我现在用药典方法 提取多糖 测黄精中多糖含量 即取60度干燥恒重的生黄精粉末0.25g，精密称定，置圆底烧瓶中，加80%乙醇150ml回流提取1h，趁热滤过，残渣用80%乙醇洗涤3次，每次10ml，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水150ml，加热回流1h，趁热滤过，残渣及烧瓶用水洗涤4次，每次10ml，合并滤液与洗液，放冷，转移至250ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀 精密吸取1ml至10ml具塞干燥试管中，加水至2ml，摇匀，在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液，至刻度，混匀，放冷后至水浴用保温10min，取出，立即置冰水浴中冷却10min，取出，以相应试剂为空白，照紫外可见分光光度计在582nm波长处测定吸光度。 我分别按上述方法提了6次样品，测得多糖含量 68% 左右。 实在搞不懂到底哪里出了问题，使测出的多糖含量这么高。。。 在做含量测定时，分别吸取1ml多糖液、1ml水和8ml0.2%蒽酮硫酸溶液时 都是用吸量管吸取的 这样重复性比较好 但是就是含量出奇的高 哪位高手指点一下 谢啦 |
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【答案】应助回帖
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1.葡萄糖标准曲线的制作 将l000µg/mL稀释为l00µg/mL。 取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液： 管号 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖标准液（mL） 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水（mL） 1 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 葡萄糖含量（µg） 0 10 20 40 60 80 100 在每支试管中立即加入蒽酮试剂5.0mL，（迅速浸于冰水浴中冷却，）各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。自水浴沸腾起计时，准确煮沸l0 min，取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。以标准葡萄糖含量（µg/ml）为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。（EXCEL作图） |
4楼2012-05-12 10:16:39
感谢参与，应助指数 +1
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3楼2012-05-08 23:22:01
5楼2012-05-12 10:28:21
6楼2012-05-16 18:03:51
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