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shui__lian

新虫 (初入文坛)

[求助] 黄精多糖含量出奇高 怎么回事

大家好
   
    我现在用药典方法 提取多糖 测黄精中多糖含量
    即取60度干燥恒重的生黄精粉末0.25g,精密称定,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150ml回流提取1h,趁热滤过,残渣用80%乙醇洗涤3次,每次10ml,将残渣及滤纸置烧瓶中,加水150ml,加热回流1h,趁热滤过,残渣及烧瓶用水洗涤4次,每次10ml,合并滤液与洗液,放冷,转移至250ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀
    精密吸取1ml至10ml具塞干燥试管中,加水至2ml,摇匀,在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液,至刻度,混匀,放冷后至水浴用保温10min,取出,立即置冰水浴中冷却10min,取出,以相应试剂为空白,照紫外可见分光光度计在582nm波长处测定吸光度。   
   

   我分别按上述方法提了6次样品,测得多糖含量  68%  左右。

   实在搞不懂到底哪里出了问题,使测出的多糖含量这么高。。。


   在做含量测定时,分别吸取1ml多糖液、1ml水和8ml0.2%蒽酮硫酸溶液时  都是用吸量管吸取的  这样重复性比较好
   但是就是含量出奇的高

   哪位高手指点一下

   谢啦
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mjnrhw

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

3楼2012-05-08 23:22:01
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.葡萄糖标准曲线的制作
将l000µg/mL稀释为l00µg/mL。
取7支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液:
管号        1        2        3        4        5        6        7
葡萄糖标准液(mL)        0        0.1        0.2        0.4        0.6        0.8        1.0
蒸馏水(mL)        1        0.9        0.8        0.6        0.4        0.2        0
葡萄糖含量(µg)        0        10        20        40        60        80        100
在每支试管中立即加入蒽酮试剂5.0mL,(迅速浸于冰水浴中冷却,)各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖,以防蒸发。自水浴沸腾起计时,准确煮沸l0 min,取出,用冰浴冷却至室温,在620 nm波长下以第一管为空白,迅速测其余各管吸光值。以标准葡萄糖含量(µg/ml)为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。(EXCEL作图)
Thinkingstorm
4楼2012-05-12 10:16:39
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
shui__lian: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢龙猫2585 2012-05-14 16:53:55
这是蒽酮硫酸法的标准方法,与你的方法有一定差距,波长选定,最好是自己进行全波长扫描确定最优的;其次样品0.25g太少了,如果原料不算很贵的话,可以适当加大量;样品测定时,吸光值应该在你的标准曲线的范围内,偏高偏低都不准确;再者,不知黄精总糖含量是多少,有可能你得到的结果是总糖,标准方法不一定适合每个原料,建议将多糖醇沉一下,复溶再测定,进行比较一下...
Thinkingstorm
5楼2012-05-12 10:28:21
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普通回帖

shui__lian

新虫 (初入文坛)

求高手  帮忙
2楼2012-05-08 18:58:37
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yaj2233

银虫 (小有名气)

如果操作没错,计算也没错,那不用太担心,我做栀子含量测定时,药典要求是不得少于1.5%,结果测出百分之五点几
6楼2012-05-16 18:03:51
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wzhw0417

铜虫 (正式写手)

即使反复洗涤,也还有还原糖或低聚糖在你的溶液中,所以致使你测出来的吸光值偏高,最后多糖含量提高。
7楼2012-06-05 15:46:25
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吹风的兔子

银虫 (初入文坛)

我最近在做枸杞多糖的提取和检测。
和你一样,参考药典的方法。刚开始,测出的多糖也出奇的高,最后分析原因,应该是色素没有除干净,导致最后色素参与反应,多糖量偏高,最后,我采用乙醚除色素2次,每次2小时,乙醇2小时。
闲暇时吹吹风
8楼2012-09-03 15:57:29
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xngajsy17

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

9楼2017-07-09 21:38:00
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dseager

新虫 (小有名气)

色素会影响含量测定,还有就是提取出来得不只是有多糖,还有单糖和寡糖,还需要醇沉一下

发自小木虫Android客户端
10楼2017-07-24 00:44:39
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