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venus0613

银虫 (小有名气)

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[求助] 黄酮大孔树脂纯化的问题

我在做大孔树脂纯化黄酮有些问题想请教：
1、我的黄酮因为某些特殊原因必须水提，其中应该水溶性黄酮含量比较高，洗脱是先采用水洗，但是水洗会一直能够洗脱下来，我洗到8倍柱体积的时候还会有黄酮检出，所以我后来就直接洗1~2BV，就直接用60%乙醇洗脱，但是最终得出的黄酮浓度不高，才20%多，怎么样才能提高黄酮纯度？我要得到50以上纯度的黄酮。
2、看到很多文献说梯度洗脱的，我也试了，30,45,60,75,90，的乙醇洗脱，发现30%的就已经洗脱了大部分，而且洗脱体积很高至少6~7BV才会含量很低，然后45%，到60%的时候洗脱液中浓度已经很低了，这样的情况是正常的么？因为我直接用60%乙醇洗脱的话4~5BV就基本上都洗脱下来了，大部分都在第2BV中。
3、如果梯度洗脱的话，是所有的洗脱液都合并还是相同浓度的合并？

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1楼2012-05-07 08:49:45

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venus0613

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 咱家老四 at 2012-05-07 14:21:26:
我只能解答你第三个问题，应该拿出几轮试验的梯度洗脱液，不要合并，分别浓缩和测含量，要三个数，一是不同成分洗脱下来的纯度能到多少、二是重量得率是多少，三是这一部分的含量得率是多少，这样的话，一方面能指 ...

不同浓度洗脱液的纯度都差不多，不超过30%
还有工业生产和实验室差别很大，并不是你想象中那样想用什么提取就用什么提取，其中会有很多方面的限制的，希望你也能够分清楚，实验室的研究并不一定适用于工业生产中！

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5楼2012-05-07 19:18:05

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咱家老四

木虫 (著名写手)

浊世俗人痴事妄言

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★ ★
树树8013: 金币+2, 谢谢老四交流讨论。 2012-05-11 15:06:51

我只能解答你第三个问题，应该拿出几轮试验的梯度洗脱液，不要合并，分别浓缩和测含量，要三个数，一是不同成分洗脱下来的纯度能到多少、二是重量得率是多少，三是这一部分的含量得率是多少，这样的话，一方面能指导你从哪些地方截流，另一方面也许对你的前两个问题有所帮助。
还有一个事，如果你的产品用其他溶剂有更高的效率或收率，而且你所说的“某些特殊原因”在工业化生产上很可能能克服，那么你的研究到最后恐怕只是研究，价值会打折扣。