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黄淮

金虫 (小有名气)

[求助] 使用分光光度计测定色素的含量

有谁知道使用分光光度计来测定植物组织中的色素含量,主要指类胡萝卜素。因HPLC标样不好买而且太贵。谢谢!
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cb08101

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

称取0.5g叶片,将其剪碎,装入具塞刻度试管中,加入乙醇-丙酮混合液(1:1)10 mL,使叶片完全浸入液体之中,加盖。
放置于暗处,如能置于30-40℃温箱中更好。
当叶片完全变白时在663 nm、645 nm波长处比色,按丙酮法计算叶绿素含量。
  Ca = 12.21 ´ A663– 2.81 ´ A646            (叶绿素a的浓度)
     Cb = 20.13 ´ A645 – 5.03 ´ A663          (叶绿素b的浓度)
     Cc =(1000 ´ A470 – 3.27 Ca – 104 Cb)/229 (类胡萝卜素总浓度)
CT = (A645 ´ 1000)/34.5               (叶绿素a、b的总浓度)

   (此法简便易行,重现性好,尤其适于大量样品的测定。最好是在浸泡过程中轻轻摇动几次。)
    注意事项:
    研磨时应在弱光下进行,研磨时间要尽量短。提取液不能浑浊,否则应重新过滤。
心若沉沦无以为伤
9楼2013-01-06 14:28:49
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dxxjhl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用紫外分光光度计法测定应该不难吧!楼主的样品不知道是什么。
不过楼主可以参照《中央民族大学学报(自然科学版)》2009年03期的文章
《紫外分光光度法测定沙棘油中总类胡萝卜素方法改进》里面的方法,自己摸索改进,应该可以完成试验的!
祝楼主试验顺利!!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

沉静太久,欲展翅高飞
2楼2012-05-03 18:21:40
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黄淮

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by dxxjhl at 2012-05-03 18:21:40:
用紫外分光光度计法测定应该不难吧!楼主的样品不知道是什么。
不过楼主可以参照《中央民族大学学报(自然科学版)》2009年03期的文章
《紫外分光光度法测定沙棘油中总类胡萝卜素方法改进》里面的方法,自己摸索改 ...

谢谢
3楼2012-05-03 22:25:53
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wfq0556

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你不用标样怎么定量啊,这和你使用的仪器有关系吗?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-05-03 23:48:55
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