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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 园艺 » 使用分光光度计测定色素的含量
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黄淮

金虫 (小有名气)

[求助] 使用分光光度计测定色素的含量

有谁知道使用分光光度计来测定植物组织中的色素含量，主要指类胡萝卜素。因HPLC标样不好买而且太贵。谢谢！
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1楼 2012-05-03 17:43:31
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cb08101

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

称取0.5g叶片，将其剪碎，装入具塞刻度试管中，加入乙醇-丙酮混合液（1:1）10 mL，使叶片完全浸入液体之中，加盖。
放置于暗处，如能置于30-40℃温箱中更好。
当叶片完全变白时在663 nm、645 nm波长处比色，按丙酮法计算叶绿素含量。
  Ca = 12.21 ´ A663– 2.81 ´ A646            （叶绿素a的浓度）
     Cb = 20.13 ´ A645 – 5.03 ´ A663          （叶绿素b的浓度）
     Cc =（1000 ´ A470 – 3.27 Ca – 104 Cb）/229 （类胡萝卜素总浓度）
CT = （A645 ´ 1000）/34.5               （叶绿素a、b的总浓度）

   （此法简便易行，重现性好，尤其适于大量样品的测定。最好是在浸泡过程中轻轻摇动几次。）
    注意事项：
    研磨时应在弱光下进行，研磨时间要尽量短。提取液不能浑浊，否则应重新过滤。
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心若沉沦无以为伤
9楼2013-01-06 14:28:49
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黄淮

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 大潇潇123 at 2012-05-13 20:49:07:
这个我们在测，用的可见光分光光度计。
紫外光光度计也可以用。
我们就采的鲜样。

你好！能否共享一下你的方法吗？谢谢！
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7楼2012-05-14 00:27:41
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普通回帖

dxxjhl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用紫外分光光度计法测定应该不难吧！楼主的样品不知道是什么。
不过楼主可以参照《中央民族大学学报(自然科学版)》2009年03期的文章
《紫外分光光度法测定沙棘油中总类胡萝卜素方法改进》里面的方法,自己摸索改进，应该可以完成试验的！
祝楼主试验顺利！！
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黄淮
沉静太久，欲展翅高飞
2楼2012-05-03 18:21:40
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黄淮

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by dxxjhl at 2012-05-03 18:21:40:
用紫外分光光度计法测定应该不难吧！楼主的样品不知道是什么。
不过楼主可以参照《中央民族大学学报(自然科学版)》2009年03期的文章
《紫外分光光度法测定沙棘油中总类胡萝卜素方法改进》里面的方法,自己摸索改 ...

谢谢
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3楼2012-05-03 22:25:53
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wfq0556

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你不用标样怎么定量啊，这和你使用的仪器有关系吗？
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黄淮
4楼2012-05-03 23:48:55
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黄淮

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by wfq0556 at 2012-05-03 23:48:55:
你不用标样怎么定量啊，这和你使用的仪器有关系吗？

谢谢你，本来想避过标样，结果还得用标样。以后还得向您多请教.
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5楼2012-05-13 15:12:47
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大潇潇123

铜虫 (正式写手)
这个我们在测，用的可见光分光光度计。
紫外光光度计也可以用。
我们就采的鲜样。
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黄淮
天天都是晴天
6楼2012-05-13 20:49:07
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TAMAHOME

金虫 (小有名气)
我也在做类胡萝卜素的测定方面的，也想知道测定方法，用分光光度计测量是否准确？谢谢~~
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让死者有那不朽的名，但让生者有那不朽的爱──
8楼2012-11-30 10:20:30
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cb08101

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

´表示乘号
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心若沉沦无以为伤
10楼2013-01-06 14:30:10
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