| 查看: 3020 | 回复: 23 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
liuxueyan21金虫 (小有名气)
|
[求助]
考马斯亮蓝法测定蛋白过程中的问题
|
||
|
各位师兄师姐，紧急求助，就是用考马斯亮蓝法测定土壤蛋白，但是不管是预实验还是正式试验，测定的结果并不相同，尽管重复了很多次，不知道问题出哪里了？忘各位师兄师姐帮帮忙。 1、标准曲线时，BSA是需要每次测定都要重新配制吗？在测样品的时候是直接加100ul待测样品，其他与标准曲线一样。 2、提取的土壤蛋白储存在4°冰箱中，放置一个礼拜左右，对测定结果有影响么？还是会有蛋白变性的可能性？还是提取完成后放置在-20°条件？ 3、考马斯染液反应时间为10min，并在一个小时之内测定完成，这个时间是不是有问题？ |
回复此楼» 猜你喜欢
酰胺脱乙酰基
已经有9人回复
-
有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福
已经有3人回复
-
CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优
已经有5人回复
-
有70后还继续奋斗在职场上的吗？
已经有6人回复
-
博士延得我，科研能力直往上蹿
已经有7人回复
-
退学或坚持读
已经有27人回复
-
面上基金申报没有其他的参与者成吗
已经有5人回复
-
遇见不省心的家人很难过
已经有22人回复
  |
17楼2012-06-12 23:44:39
suruijing
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 3750.1
- 散金: 777
- 红花: 2
- 帖子: 808
- 在线: 422.1小时
- 虫号: 1087003
- 注册: 2010-09-01
- 性别: MM
- 专业: 污染控制化学
liuxueyan212楼2012-06-05 19:01:56
【答案】应助回帖
★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 22:19:17
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 22:19:17
| 4度放置时间长了肯定有问题，这个温度下有一部分蛋白酶还是有活性的。土壤中的其他物质有可能对考染的结果产生影响。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
3楼2012-06-05 21:27:06
gywyl1977
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2590.7
- 红花: 3
- 帖子: 548
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1631149
- 注册: 2012-02-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
★
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:27:59
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:27:59
|
1) BSA需要一批多配些，分装在棕色瓶中，4度保存。做标准曲线不需要每次都重配，但做好每一瓶做好标准曲线后尽快用掉。启用另一瓶时，如果间隔时间长，需要重新做标准曲线； 2）蛋白提取后肯定要冷冻保存。 3）显色反应一般都在半小时以内。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4楼2012-06-06 00:35:09