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saliangqh

新虫 (正式写手)

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[交流] DNA电泳

跑DNA电泳的亲们交流一下DNA电泳吧谢谢了

这是我跑的电泳
用CTAB法提取
将样品加20μl SDS和1ml预热的CTAB提取液，在65℃下水浴1h，其每间隔5min轻轻摇晃，加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇=25:24:1，在漩涡混合器上震荡混匀，10000r4℃离心10min，取上清加1ml冷冻的无水乙醇和50μl乙酸钠（3M PH=5）-20℃冷冻1h，10000r4℃离心10min，用70%无水乙醇洗涤2次，干燥后加TE溶解，-20℃保存备用。
0.8%琼脂糖电泳染色10min 凝胶成像
出来的图像是这样的想请大家帮分析一下谢谢

[ Last edited by saliangqh on 2012-5-2 at 17:11 ]

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1楼 2012-05-01 21:07:56

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ZOEY21

金虫 (小有名气)

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从左到右应该说6、7、8看到点样孔发亮，有蛋白残留。
1、2还是可以的。7、8也看得到单一亮带。（这点想跟大家交流下，有人说基因组DNA电泳就应该是这种弥散状的，也有人说应该是单一无拖尾的细条带，哪种对呐）
所有样品都弥散了，操作过程动作太剧烈，DNA打碎了。
水浴1h没有问题。（这个时间以前我们这么干过）
RNA觉得跑电泳不好看就加RNA酶，不去一般不影响后续的PCR。
这种程度的DNA要求不严的PCR可以出结果。（3、4就不敢说了）