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韩柳

金虫 (小有名气)

超级金虫

[求助] 高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些?各自的最大吸收值是多少nm?已有1人参与

最近在做异喹啉-5-磺酸的有关物质方法学,想找到合适的流动相和检测波长。用紫外扫了下波长,在216nm处有最大吸收,在271nm处有第二大吸收,很多流动相在216nm处也会有吸收,会不会影响检测结果啊?应该选择什么波长和流动相呢?另外有没有相关文献或资料介绍常用流动相(缓冲盐溶液)的最大吸收波长及选择方法?非常希望各位前辈能给些帮助或建议!谢谢你们了!
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交论坛可交之人
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

波长最好是271,如果一定要用216的话有机相最好用乙腈。因为甲醇截至波长是220,而乙腈是190,不过即使用乙腈也会有一点影响……缓冲盐的话用磷酸盐,就能涵盖大部分的PH了。另外,你说的20%有机相只有一个杂质峰的问题,改变流动相比例确实只能改变出峰时间,但是,你要考虑时间长短的问题,20%对于没检测到那个杂质峰来将可能极性比较小,它在柱子上吸附的较好,保留时间过长,长到超过你那针的截止时间了。
9楼2012-05-17 12:13:32
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-28 12:47:50
建议选择271nm,216nm附近背景吸收偏高,且氘灯能量偏低。选择最大吸收波长只是一般情况下,这个波长可根据实际情况调整。
守候在风中的宁静。
2楼2012-04-28 08:23:47
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韩柳

金虫 (小有名气)

超级金虫

用216nm波长检测时,主峰后面能检出两个杂质,用271的波长也能检测到两个杂质,但是没有216nm下检测到的杂质大,因为271nm灵敏度没有216nm处的高,有机相比例为40%时,两个波长都能检测到两个杂质,但在271你们,有机相20%时就只能检测到一个杂质了!请问这是怎么回事啊?调节流动相的比例不是只改变出峰时间吗?另外,如果我想用216nm的波长,那么什么流动相在216nm处干扰比较小或者没有干扰呢?
交论坛可交之人
3楼2012-04-29 14:25:55
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阳光快乐

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-08 09:32:45
那可能是你测的杂质在216处有强吸收,在271处 吸收弱
4楼2012-05-07 11:21:54
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