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关于Illumina Solexa如何区分不同碱基荧光
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我最近在看关于高通量测序的文章，但是Solexa的测序原理看完下面两段话就有些困惑了： Solexa测序的反应在叫做flow cell的玻璃管中进行，flow cell又被细分成8个Lane，每个Lane的内表面有无数的被固定的单链接头。上述步骤得到的带接头的DNA 片段变性成单链后与测序通道上的接头引物结合形成桥状结构，以供后续的预扩增使用。 在测序的flow cell中加入四种荧光标记的dNTP 、DNA 聚合酶以及接头引物进行扩增，在每一个测序簇延伸互补链时，每加入一个被荧光标记的dNTP就能释放出相对应的荧光，测序仪通过捕获荧光信号，并通过计算机软件将光信号转化为测序峰，从而获得待测片段的序列信息。 第一：形成的桥式PCR产物如何形成单链直PCR？ 第二：最不明白的就是将带接头的DNA片段加入到玻璃管内是像454的单一的DNA片段还是很多种不同的DNA片段混合，如果是混合片段的话，加入不同的碱基发出不同的荧光怎么区分是从哪一种DNA片段中发出来的呢？ |
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