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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 药物绝对回收率中脑组织蛋白沉淀剂的选择
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woolyn@lu

金虫 (小有名气)

[求助] 药物绝对回收率中脑组织蛋白沉淀剂的选择

我做绝对回收率时，同一种沉淀剂（乙腈），血中回收率较高，但脑中回收率偏低，脑组织和血浆蛋白沉淀剂有什么不同吗，脑组织蛋白沉淀一般用什么呢？是否可以直接用沉淀剂进行匀浆，如果可以的话若让蛋白质沉淀完全，至少用多少倍体积的呢（V/W)
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莫等待！
1楼 2012-04-26 17:31:04
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-26 19:42:26
woolyn@lu: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-04-27 10:25:48
首先需要排除药物在脑组织匀浆中是稳定的，然后可以选用3倍体积的乙腈沉淀蛋白，或者改用液液萃取
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2楼2012-04-26 19:11:19
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woolyn@lu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-04-26 19:11:19:
首先需要排除药物在脑组织匀浆中是稳定的，然后可以选用3倍体积的乙腈沉淀蛋白，或者改用液液萃取

如果用盐酸作为匀浆剂的话是不是也可以啊？用多少浓度的盐酸呢？也是3倍体积的盐酸吗？
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莫等待！
3楼2012-04-26 22:13:08
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
匀浆过程可以用生理盐水或者磷酸缓冲液，之后需要经蛋白沉淀，选用乙腈或者其他的有机萃取剂
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4楼2012-04-26 22:36:28
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85773627

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.考虑到化合物稳定的话，匀浆液可以用3倍体积磷酸盐buffer。

2.如果化合物不是太稳定，匀浆液可以选择
a.  3倍体积的沉淀剂
b. 3倍体积的buffer与沉淀剂混合液 （体积比自己摸索）

3. 回收率不高与沉淀剂选择也有很大关系
a.甲醇做沉淀剂 沉淀为絮状，有利于化合物的提取，不利于离心沉淀。
b.乙腈做沉淀剂 沉淀为块状，不利于蛋白多的样品提取，但是对于离心沉淀是有利的。
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5楼2012-04-27 12:38:14
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