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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 功能基因扩增相关
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jingyi_180

银虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 晓风残月cl at 2012-04-26 14:38:56:
问题1：提取纯菌和环境样品中的总DNA后的下一步是不是必须进行DNA纯化？我的目的是扩增功能基因。
一般需要通过切胶回收克隆   不然PCR产物中的一些东西可能会对后续的功能分析有影响    最好是提质粒吧  
问题 ...

非常O(∩_∩)O谢谢。
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11楼2012-04-27 17:28:18
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者
★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-28 09:24:02
引用回帖:
10楼: Originally posted by jingyi_180 at 2012-04-27 17:27:04:
恩恩，写的好详细，非常感谢，我基本都明白了，但是我读完你写的这个就觉得我没希望了。。。

都是这么过来的，我意思是你找一个比较懂得，这样可以减少错误。以前我什么都不懂，现在懂点了；我小老板读博士连质粒都不会提取，现在分子生物学很牛气；我一个哥们刚来美国连枪都不会用，现在发表10分和9分各一篇。
学习有自己摸索和借鉴两种途径，只要努力都会走通，只是时间问题。最后祝福你，相信自己！
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好好做事，踏实做人！
12楼2012-04-28 00:47:59
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-29 17:20:22
引用回帖:
9楼: Originally posted by 晓风残月cl at 2012-04-26 14:38:56:
问题1：提取纯菌和环境样品中的总DNA后的下一步是不是必须进行DNA纯化？我的目的是扩增功能基因。
一般需要通过切胶回收克隆   不然PCR产物中的一些东西可能会对后续的功能分析有影响    最好是提质粒吧  
问题 ...

谢谢这位同学回复，但是可能你不是做细菌多样性的。因此做的建议我觉得不行。还望楼主仔细甄别。
1，楼主要做的是提取基金组DNA，之后做PCR扩增。这个和质粒没多大关系。当然我们做基因改造或者表达蛋白时候需要通过质粒来完成，这时候需要质粒这个媒介。但是在这里显然是不对头的。
2，这点你说的没错，但是那是研究基因的方法和策略，而且楼主问的东西也没那么高深，你说得这些东西有用，但是在这里很容易把刚接触的人弄得更迷糊。
3，你的话还是对的，但是真的文不对题。
总之谢谢你解答，也花了不少时间。但是我觉得你没搞明白楼主想得到的信息就给出一系列答案，而这些答案隐蔽性有很强，很容易误导人。所以我出来纠正一下，对事不对人，因为我分子生物学也是半调子，说得不对还望海涵。
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好好做事，踏实做人！
13楼2012-04-29 07:17:27
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by ctt1984 at 2012-04-29 07:17:27:
谢谢这位同学回复，但是可能你不是做细菌多样性的。因此做的建议我觉得不行。还望楼主仔细甄别。
1，楼主要做的是提取基金组DNA，之后做PCR扩增。这个和质粒没多大关系。当然我们做基因改造或者表达蛋白时候需要 ...

呵呵   对事不对人    大家共同学习   
我也就学一年的分子生物学
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14楼2012-04-29 20:19:46
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by jingyi_180 at 2012-04-27 17:27:04:
恩恩，写的好详细，非常感谢，我基本都明白了，但是我读完你写的这个就觉得我没希望了。。。

大家共同进步吧  其实我也就学了几个月的分子生物学   呵呵
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15楼2012-04-30 11:21:57
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