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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请教，HPLC，怎么才能有一个好的分离度？
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尼米兹

银虫 (小有名气)

[求助] 请教，HPLC，怎么才能有一个好的分离度？

请教，HPLC，怎么才能有一个好的分离度？特别是对于新的化合物，新开发的HPLC方法，首次应用于检测中，特别是在工艺开发阶段，怎么才能保证每个物质都有良好的分离度，不至于该分离的物质，没有良好的分离开？谢谢！
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1楼 2012-04-24 00:24:06
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xf000963

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 鼓励新虫 欢迎常来分析版交流 ^^ 2012-04-25 00:08:57
通过改变相对保留时间,包括：流动相配比、pH值、离子对试剂、柱温度，流速等方面。这些要根据自己关注的难分离组分对的具体情况有选择的实施，所以，必须首先了解它们之间化学性质的差异，然后有针对地选择处理手段。
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2楼2012-04-24 08:11:13
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+1 2012-04-25 00:09:07
只能通过流动相组成（比例及pH、离子对）、柱温、流速、梯度慢慢调试。
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守候在风中的宁静。
3楼2012-04-24 08:18:14
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浮萍happy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-04-25 00:09:23
可以先查阅相关文献确定这类物质的主要性质，根据文献上提供的方法先做一遍，再根据分离情况调整方法，主要是流动相配比、pH、离子对、梯度等。在液相色谱中，柱温对分离效果影响很小，而在气相色谱中，柱温则是影响分离效果的主要因素。
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4楼2012-04-24 09:11:41
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bobking67310

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
色谱柱本身也是重要因素，依据不同色谱柱分析物质的范围不同合理选择色谱柱，然后调节色谱分析的各个条件
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5楼2012-04-24 09:19:06
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先查查文献噻 然后按照文献的做做 看能不能重现 如果不行 就只有做下全梯度洗脱喽 嗯 还有 直接联系卖柱子的厂家 让他们帮你摸索一下方法噻
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6楼2012-04-24 18:31:28
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liyf7787

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要选择合适的流动相，找出合适的比例；或者调解柱温、流速、pH值；样品进样前的处理，这些都是一个摸索的过程，需要多花些心思
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Nobody can go back and start a new begining, but anyone can start now and make a new ending.
7楼2012-04-25 09:02:26
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liuwei10987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据要分离的物质的理化性质，选择合适的色谱柱，流动相，根据样品的酸碱性，调流动相的PH，调节流动相比例或梯度，逐渐优化。
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8楼2012-04-25 12:54:11
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镏金岁月

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先根据化合物性质，相关资料拟定条件。
优选柱温、流速、流动相比例、pH、流动相种类。
多查资料可以少走弯路的。
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9楼2012-04-26 14:17:43
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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
流动相配比中水的比例约大，一般分离的越开；流速减慢也可以使其分离的远一些；至于升高柱温可以使得峰形尖，这样不至于与其他峰接在一起；对于一些碱性物质的检测，在流动相的水中加入少许酸（但一定要少，不然会堵塞柱子）也可以修饰峰形。至于具体的还需要实践。
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10楼2012-04-27 16:15:35
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