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急求！！96孔板棋盘微量稀释法具体方法？？？ 已有1人参与
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我要做联合药敏试验。我想用96孔微量棋盘稀释法测两种抗菌物的MIC和FIC值，，急求溶解抗菌药溶剂，丁二酸用什么溶解呢？96孔板又用什么规格的呢？96孔板怎么灭菌呢？能不能跟我说下具体步骤，不胜感激！！！ 受试菌分别有肠炎沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 受试菌是大肠杆菌 肠炎沙门氏菌 金黄色葡萄球菌三种，但我不清楚这三种菌最后用酶标仪测分别选取多达波长来测！抗菌药梯度稀释的范围又改选多大尼？ 联合最小抑菌浓度是它们联合用药后与空白对照吸光度一样的那些结果中的它们各自最小抑菌浓度， 能不能举例一次96孔棋盘的结果列表说明一下，我很困惑，万一出现A药浓度是2，B药浓度是3；A药浓度是3，B药浓度是2，这两种，我该选取哪个为最小抑菌浓度呢？ [ Last edited by rosetina on 2012-4-23 at 00:05 ] |
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3楼2012-04-23 09:54:43
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4楼2012-04-23 23:27:58
liudaochuang
金虫 (小有名气)
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5楼2012-09-05 16:13:52
【答案】应助回帖
| 先培养到一定浓度然后在单孔体积为360μL 的 96 孔细胞培养板内采用逐级稀释法测定MIC，共选取 8 个浓度梯度：a%、b%、c%、d%、e%、f%、g%、h%、i%、g%、0。在无菌操作台内进行实验，（根据96孔板的结构，12*8孔，注意每组设置6个平行，1行2个梯度，一共用5.5行，一共10个梯度，一组对照）在1-55孔中加入100μL 菌液，在第一梯度孔中加入100μL储备液，混合均匀后取出100 μL加入第二梯度孔中，再混合均匀后取出100 μL加入第三梯度孔中，依次类推，到第10梯度孔时混合均匀后取出100 μL弃去，后面5孔为对照组，剩下的孔可以添加100μL无菌水或者培养基。37℃振荡培养24 h，酶标仪记录浊度变化。能抑制溶液浊度变化的最低浓度就是最小抑菌浓度。 |
6楼2014-05-19 17:15:27
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7楼2023-04-11 20:45:55
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