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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)

[求助] 测酶活中的缓冲液怎么配制

0.1mol/LPh=4.8醋酸缓冲液,250mmol/LPH=3.0和50mmol/LPH=4.5的酒石酸溶液怎么配制?
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, 应助指数+1, 好厉害啊~我可算不来,呵呵…… 2012-04-24 23:21:07
补充一点:缓冲溶液的配制方法小结:
1.用Henderson-Hasselbalch方程,pH=pKa+lg[C(HA-)/C(H2A)],
算出共轭碱(HA-)与共轭酸(H2A)的物质的量的比例(摩尔数比例)。
2.对于多元弱酸,用Henderson-Hasselbalch方程,共轭酸变为共轭碱永远只取一级电离,也就是共轭碱(HA-)永远只带一个负电荷,因为二级解离要在一级解离的基础上,一般不必考虑。
3.对于多元弱酸,用Henderson-Hasselbalch方程,pKa永远取pKa1。
4.配制时比较简单的完整操作办法:将共轭碱(HA-)与共轭酸(H2A)的物质的量的总量定为1摩尔,并且共轭碱(HA-)与共轭酸(H2A)的物质的量的比例加以换算,是固体则换算成质量,是液体按其占有摩尔比换算成体积。
举例:以第三题为例
“250mmol/L的PH=4.5的酒石酸缓冲溶液的配制方法:
pH=pKa1+lg[C(HA-)/C(H2A)]
4.5=3.04+lg[C(HA-)/C(H2A)]
lg[C(HA-)/C(H2A)]=1.46
[C(HA-)/C(H2A)]=28.8403
也就是[C(HA-)/C(H2A)]=29/1,即配制时取【酒石酸钠的物质的量(摩尔数)】/【 酒石酸的物质的量(摩尔数)】=29/1.”
酒石酸钠的物质的量(摩尔数)+酒石酸的物质的量(摩尔数)=1mol溶质,
这1mol溶质中酒石酸钠的物质的量(摩尔数)是29/30mol,用29/30mol X “酒石酸钠的分子量”=所要的酒石酸钠的质量。
酒石酸是液体,我们用在1mol 溶质中: 酒石酸的物质的量(摩尔数)-----也就是:1/30mol/“酒石酸溶液的摩尔浓度”=酒石酸所需的体积。“酒石酸溶液的摩尔浓度"是指你们实验室的现货酒石酸溶液的摩尔浓度,当然要比最终缓冲溶液浓度大,不然还要先浓缩。

这样,1mol溶质中酒石酸钠和酒石酸就凑齐了,先把两者都放进1L的烧杯中,然后向里注蒸馏水直到总体积到达1L或略少,搅拌均匀,测定PH,可往里面加极少量的酒石酸钠或酒石酸把PH值跳到4.5. 如此,你就有了1L的1mol/L的PH=4.5酒石酸缓冲溶液,然后再稀释到250mmol/L,稀释过程不影响pH值。除非无限稀释,因为那时就要考虑的水的pKa了。
11楼2012-04-24 22:41:46
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fanglove0o0

金虫 (小有名气)

是做酶活力的吗?交流交流啊
2楼2012-04-22 21:26:29
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fanglove0o0 at 2012-04-22 21:26:29:
是做酶活力的吗?交流交流啊

是测酶活啊,你测得什么酶?
3楼2012-04-22 21:33:02
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fanxiaojuan: 金币+6, ★★★很有帮助, 很详细,非常感谢 2012-04-23 08:42:21
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, good 2012-04-23 10:32:56
我把过程给你整个讲一遍,下次你自己就会算了。

醋酸缓冲溶液的配法
公式pH=pKa+lg([AC-]/[HAC]) =4.8
HAC的pKa=4.75
代入得[AC-]/[HAC]=10^(0.05)=1.20
所以只要醋酸钠和醋酸的物质的量之比为1.20,即可。醋酸根(包括解离和未解离的)的总摩尔浓度0.1mol/L,其中[AC-]占0.1mol/L的54%,[HAC]占0.1mol/L的46%。
如果要配100mL的醋酸缓冲溶液,则需要NaAc(3H2O)  0.1X54%X0.1mol, 即0.0054mol,需要冰醋酸0.1X46%X0.1mol, 即0.0046mol,
事先配好1 mol/L 的NaAc(3H2O)溶液和1 mol/L的 HAc溶液(由冰醋酸加蒸馏水配成),则取
1 mol/L  NaAc  溶液5.4(mL),0.0054 mol,
1 mol/L  HAc  溶液4.6 (mL),0.0046mol,
一起混匀,然后加蒸馏水稀释到100mL.
(NaAc•3H2O分子量=136.09)
4楼2012-04-22 23:43:16
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