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xiaolanzi

新虫 (小有名气)

[求助] 小麦谷蛋白凝胶电泳,样品打不进泳道,总是浮起来,急死了

做小麦谷蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳,所用的上样缓冲液是提取液D: 0.625 mol/L Tris-HCl (pH=6.8)+5% 巯基乙醇+20%甘油+2% SDS+0.2%溴酚蓝,样品打不进泳道总是浮起来,想求助大家到底是哪有问题啊,样品我都提了两次了,急死了

提取方法是:提取液A: 50%异丙醇; 提取液B: 50%异丙醇+0.04 mol/L Tris-HCl (pH=8.0)+10% SDS+2%二硫苏糖醇(DTT); 提取液C: 50%异丙醇+0.04 mol/L Tris-HCl (pH=8.0)+10% SDS+1.4%4-乙烯基吡啶(VP); 样品是30mg
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liliinjn

金虫 (小有名气)

是的 楼上说的也有可能 如果是样品密度太小的话好像可以通过加入一定比例蔗糖增大样品密度
13楼2012-04-20 13:10:09
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liliinjn

金虫 (小有名气)

正负极有没有接反?
2楼2012-04-19 10:26:05
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
增加loading buffer?看看是否可以解决上浮问题。
3楼2012-04-19 18:58:16
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chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那是因为样品密度太小把TE浓度减小或者增加样品浓度不行吗
人的差别在于业余时间
4楼2012-04-19 20:40:24
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