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xiaolanzi

新虫 (小有名气)

[求助] 小麦谷蛋白凝胶电泳,样品打不进泳道,总是浮起来,急死了

做小麦谷蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳,所用的上样缓冲液是提取液D: 0.625 mol/L Tris-HCl (pH=6.8)+5% 巯基乙醇+20%甘油+2% SDS+0.2%溴酚蓝,样品打不进泳道总是浮起来,想求助大家到底是哪有问题啊,样品我都提了两次了,急死了

提取方法是:提取液A: 50%异丙醇; 提取液B: 50%异丙醇+0.04 mol/L Tris-HCl (pH=8.0)+10% SDS+2%二硫苏糖醇(DTT); 提取液C: 50%异丙醇+0.04 mol/L Tris-HCl (pH=8.0)+10% SDS+1.4%4-乙烯基吡啶(VP); 样品是30mg
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
增加loading buffer?看看是否可以解决上浮问题。
3楼2012-04-19 18:58:16
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liliinjn

金虫 (小有名气)

正负极有没有接反?
2楼2012-04-19 10:26:05
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chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那是因为样品密度太小把TE浓度减小或者增加样品浓度不行吗
人的差别在于业余时间
4楼2012-04-19 20:40:24
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xiaolanzi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liliinjn at 2012-04-19 10:26:05:
正负极有没有接反?

没有接反啊,就是点样的时候都点不进去,还没有接正负极
5楼2012-04-19 23:57:10
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