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yzhlasiI

铁虫 (正式写手)

[求助] 有谁知道毛细管在线预浓缩如何操作?

小弟从事毛细管电泳研究,最近打算使用等电聚焦(CITP)或推扫进样(Sweeping)做在线浓缩。

通过查阅文献得知,如果需要在低pH条件下进行浓缩(即低EOF)时,可采用大压力进样以保证样品离子进入毛细管柱,压入毛细管的长度从20%-100%不等。

但是实际操作后发现,在压入大体积样品后,电流一直上不到正常值,而且不稳。
我的样品是溶解在70%ACN里的,起初怀疑是ACN和水电导低所致,于是改用Buffer溶解,但是发现这么做没有浓缩的效果。

请教高手:
1.CITP或Sweeping的操作是不是本身在低电流下进行的?是不是无视电流不稳的情况?
2.一般CITP的前导离子和尾随离子是怎么选择的?
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