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有谁知道毛细管在线预浓缩如何操作?
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小弟从事毛细管电泳研究,最近打算使用等电聚焦(CITP)或推扫进样(Sweeping)做在线浓缩。 通过查阅文献得知,如果需要在低pH条件下进行浓缩(即低EOF)时,可采用大压力进样以保证样品离子进入毛细管柱,压入毛细管的长度从20%-100%不等。 但是实际操作后发现,在压入大体积样品后,电流一直上不到正常值,而且不稳。 我的样品是溶解在70%ACN里的,起初怀疑是ACN和水电导低所致,于是改用Buffer溶解,但是发现这么做没有浓缩的效果。 请教高手: 1.CITP或Sweeping的操作是不是本身在低电流下进行的?是不是无视电流不稳的情况? 2.一般CITP的前导离子和尾随离子是怎么选择的? |
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