2楼: Originally posted by castlered at 2012-04-18 16:06:09:
文献上的条件不一定适合你自己，调整引物浓度，比例，退火温度等多试试吧，多重本身就不是特别稳定的

3楼: Originally posted by czlx at 2012-04-18 16:54:13:
我有8对引物，怎么调整比例啊？是希望出现的那对引物多一些吗？

4楼: Originally posted by castlered at 2012-04-18 17:15:11:
你只扩增一个样品么？一般来说调整使整个体系对不同样品扩增的产物亮度差不多。比如引物A,B,C,D分别对应样品1,2,3,4，如果扩增结果1的产物相对2,3,4比较弱，就稍微多加一些引物A。如果有非特异就提高退火温度，不 ...

6楼: Originally posted by dmzha at 2012-04-19 08:12:35:
建议参考我的硕士论文《基于线粒体DNA序列的鹿产品分子检测》。

7楼: Originally posted by czlx at 2012-04-19 18:16:10:
嗯，好的，我想问问啊？跑出来下面引物二聚体特别亮，目的带暗怎么办啊？？？？、

8楼: Originally posted by dmzha at 2012-04-19 20:47:46:
可能是你的引物没有设计好，引物之间形成二级结构。做多重PCR，引物设计很关键，同一引物间不能形成二级结构，不同引物间也不能形成二级结构（这一点在设计引物时很容易忽视）。

9楼: Originally posted by czlx at 2012-04-19 22:06:57:
那能通过条件优化消除吗？不换引物可以吗？