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铜虫 (初入文坛)

[求助] pcr

我做多重pcr，按文献条件做不出的，哪位知道优化条件啊？？？？？

1楼 2012-04-17 17:59:30

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木虫 (小有名气)

感谢参与，应助指数 +1

文献上的条件不一定适合你自己，调整引物浓度，比例，退火温度等多试试吧，多重本身就不是特别稳定的

2楼2012-04-18 16:06:09

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木虫 (小有名气)

引用回帖:

3楼: Originally posted by czlx at 2012-04-18 16:54:13:
我有8对引物，怎么调整比例啊？是希望出现的那对引物多一些吗？

你只扩增一个样品么？一般来说调整使整个体系对不同样品扩增的产物亮度差不多。比如引物A,B,C,D分别对应样品1,2,3,4，如果扩增结果1的产物相对2,3,4比较弱，就稍微多加一些引物A。如果有非特异就提高退火温度，不出就降低，总之各种尝试。做多重就天天一波波地PCR吧

4楼2012-04-18 17:15:11

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