21楼: Originally posted by qdlinxiaofei at 2012-04-20 10:09:43:
可以的 3“端结合紧密就可以 5”段可以适当的飘一下，你的简并系数比较少才是2和24. ，你要考虑全面，我设过比这个更夸张的简并引物 也出来了。祝好运

18楼: Originally posted by 小猫三两只 at 2012-04-18 09:19:20:
引物3′端错配时，不同碱基引发效率存在着很大的差异，当末位的碱基为A时，即使在错配的情况下，也能有引发链的合成，而当末位链为T时，错配的引发效率大大降低，G、C错配的引发效率介于A、T之间，所以3′端最好 ...

19楼: Originally posted by gjs713 at 2012-04-18 10:43:31:
你的下游引物兼并得太多了吧

我们这边设计这个的原则是不超过3个，并且不连续出现

20楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-20 00:52:44:
我觉得引物短了点，而且还有兼并引物，可能会多少影响扩增的专一性，另外，我个人认为下游引物3‘末端应以G/C结尾可能扩增的专一性会略有上升（可能GC或CG较好），因为引物较短，可能这样作用还稍大些。

我现在 ...