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我是驴

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白酶K和RNase A能共存吗?

请问一下,溶液中蛋白酶K和RNase A能共存吗?蛋白酶K会不会将RNase A降解掉哈?
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努力向前
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
想法很好,但是以后可以尝试先搜索一下:“此酶(蛋白酶K)经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。” 看来商品化的蛋白酶K是经过处理的咯
2楼2012-04-16 09:03:39
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-16 21:08:09
RNase A是蛋白,会被降解。
楼主要提基因组?室温RNase A先处理,完了蛋白酶K,56度处理。
3楼2012-04-16 14:07:17
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我是驴

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-04-16 14:07:17:
RNase A是蛋白,会被降解。
楼主要提基因组?室温RNase A先处理,完了蛋白酶K,56度处理。

总得先把细胞破了再用RNase A处理较好吧。
努力向前
4楼2012-04-16 23:50:12
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幺幺甲

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 我是驴 at 2012-04-16 23:50:12
总得先把细胞破了再用RNase A处理较好吧。...

我想问下楼主,最后怎么用的RNAase加蛋白酶K前加的,还是后加的?
5楼2012-07-05 17:09:21
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我是驴

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 幺幺甲 at 2012-07-05 17:09:21
我想问下楼主,最后怎么用的RNAase加蛋白酶K前加的,还是后加的?...

RNAase在蛋白酶K前加
努力向前
6楼2012-07-05 20:50:21
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boyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-06 13:37:49
蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。所以,这两种酶不可能共存!至于这两种酶加入的顺序,就要看你的目的了。
自由之思想,独立之灵魂
7楼2012-07-05 23:22:45
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我是驴

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by boyx at 2012-07-05 23:22:45
蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。所以,这两种酶不可能共存!至于这两种酶加入的顺序,就要看你的目的了。

呵呵,谢谢啦!
努力向前
8楼2012-07-06 10:21:59
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小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪

显然是不可以的,我们之前还用蛋白酶K消化RNA酶  效果比DEPC好    不过楼主如果需要蛋白酶K和无DNA酶污染的RNAse A 我们自己有生产,价格实惠
生命还需要奇迹来衬托
9楼2012-09-11 08:43:14
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