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悠悠6690

新虫 (小有名气)

[求助] 西瓜花粉离体萌发的培养基配方

小弟今年要做个西瓜花粉离体萌发的试验,现在花还没出来,就用油菜花先做了个预备试验,按文献上做,固体培养基:琼脂1%,蔗糖15%,硼酸0.01%,PH6.4。黑暗28°C培养6小时后跟新鲜花粉的形状是一样的呢,就是没萌发!!!各位前辈能否指点一下花粉离体培养时,培养基只加以上3样药品,还是要像组培那样把微量大量元素都都加啊?液体培养好,还是固体培养呢?
             谢谢
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
悠悠6690: 金币+6, ★★★★★最佳答案 2012-04-16 14:39:24
孙启亮: 金币+1, 感谢应助 2012-04-17 21:19:35
一般不是,花粉有三萌发孔,四萌发孔等多种,椭圆形三孔的萌发一般呈沟状,平行于纵轴,有点像西瓜的纹路

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9楼2012-04-16 10:58:44
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悠悠6690

新虫 (小有名气)

自己·顶下
2楼2012-04-12 17:40:39
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
悠悠6690: 金币+8, 有帮助 2012-04-14 15:11:08
一般的,液体培养基不加琼脂,哈哈
固体培养基每L加琼脂4-6g,蔗糖100-150g(因物种而异),及硼酸(浓度因物种而异,部分物种可不加)。
注意培养温度
注意湿度保持
3楼2012-04-13 07:19:36
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悠悠6690

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-13 07:19:36:
一般的,液体培养基不加琼脂,哈哈
固体培养基每L加琼脂4-6g,蔗糖100-150g(因物种而异),及硼酸(浓度因物种而异,部分物种可不加)。
注意培养温度
注意湿度保持

恩,我改用液体培养基了,刚又做了,加了硼酸和硝酸钙希望能看到萌发,呵呵,谢咯,对了湿度怎么解决啊?
4楼2012-04-14 15:13:53
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
悠悠6690: 金币+8, 有帮助 2012-04-14 22:13:08
载玻片放在放有湿滤纸的培养皿中(加盖)就可以实现保湿的愿望。
5楼2012-04-14 19:46:09
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悠悠6690

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-14 19:46:09:
载玻片放在放有湿滤纸的培养皿中(加盖)就可以实现保湿的愿望。

哈哈哈,谢谢啦!刚看到,每个花粉粒都长出了像线一样的东西,但并不是直直长,大多数像一团蜷在一起线,蜷在一起的会不会是细胞破裂释放的内含物啊?还是这个就是萌发的花粉管啊?小弟第一次做这个,真不知道如何判断,要不要加PEG了呢,我用的10%蔗糖
6楼2012-04-14 22:22:17
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
悠悠6690: 金币+8, ★★★很有帮助 2012-04-15 21:09:06
换成固体培养基,可能会长得更直。观察时调节显微镜,如果是从萌发孔中伸出的就是花粉管。如果只是和线一样的,可能是菌。
你可以在培养30min,1h,等不同时间观察,不一定非要等到参考文献描述的3h后。萌发前期花粉管露出小芽,有利于你判断。
7楼2012-04-15 19:52:54
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悠悠6690

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-15 19:52:54:
换成固体培养基,可能会长得更直。观察时调节显微镜,如果是从萌发孔中伸出的就是花粉管。如果只是和线一样的,可能是菌。
你可以在培养30min,1h,等不同时间观察,不一定非要等到参考文献描述的3h后。萌发前期花 ...

呵呵,非常感谢啊!您的建议非常好,我再试一试。对了,花粉如果是椭圆的,那么是不是萌发孔都只是在两极啊?
8楼2012-04-15 21:17:01
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悠悠6690

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-16 10:58:44:
一般不是,花粉有三萌发孔,四萌发孔等多种,椭圆形三孔的萌发一般呈沟状,平行于纵轴,有点像西瓜的纹路

我拜您为师吧!
10楼2012-04-16 14:40:00
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