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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 西瓜花粉离体萌发的培养基配方
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悠悠6690

新虫 (小有名气)

[求助] 西瓜花粉离体萌发的培养基配方

小弟今年要做个西瓜花粉离体萌发的试验，现在花还没出来，就用油菜花先做了个预备试验，按文献上做，固体培养基：琼脂1%,蔗糖15%，硼酸0.01%，PH6.4。黑暗28°C培养6小时后跟新鲜花粉的形状是一样的呢，就是没萌发！！！各位前辈能否指点一下花粉离体培养时，培养基只加以上3样药品，还是要像组培那样把微量大量元素都都加啊？液体培养好，还是固体培养呢？
             谢谢
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1楼 2012-04-12 15:11:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
悠悠6690: 金币+6, ★★★★★最佳答案 2012-04-16 14:39:24
孙启亮: 金币+1, 感谢应助 2012-04-17 21:19:35
一般不是，花粉有三萌发孔，四萌发孔等多种，椭圆形三孔的萌发一般呈沟状，平行于纵轴，有点像西瓜的纹路
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悠悠6690
9楼2012-04-16 10:58:44
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普通回帖

悠悠6690

新虫 (小有名气)
自己·顶下
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2楼2012-04-12 17:40:39
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
悠悠6690: 金币+8, ★有帮助 2012-04-14 15:11:08
一般的，液体培养基不加琼脂，哈哈
固体培养基每L加琼脂4-6g，蔗糖100-150g(因物种而异)，及硼酸（浓度因物种而异，部分物种可不加）。
注意培养温度
注意湿度保持
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3楼2012-04-13 07:19:36
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-13 07:19:36:
一般的，液体培养基不加琼脂，哈哈
固体培养基每L加琼脂4-6g，蔗糖100-150g(因物种而异)，及硼酸（浓度因物种而异，部分物种可不加）。
注意培养温度
注意湿度保持

恩，我改用液体培养基了，刚又做了，加了硼酸和硝酸钙希望能看到萌发，呵呵，谢咯，对了湿度怎么解决啊？
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4楼2012-04-14 15:13:53
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
悠悠6690: 金币+8, ★有帮助 2012-04-14 22:13:08
载玻片放在放有湿滤纸的培养皿中（加盖）就可以实现保湿的愿望。
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5楼2012-04-14 19:46:09
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-14 19:46:09:
载玻片放在放有湿滤纸的培养皿中（加盖）就可以实现保湿的愿望。

哈哈哈，谢谢啦！刚看到，每个花粉粒都长出了像线一样的东西，但并不是直直长，大多数像一团蜷在一起线，蜷在一起的会不会是细胞破裂释放的内含物啊？还是这个就是萌发的花粉管啊？小弟第一次做这个，真不知道如何判断，要不要加PEG了呢，我用的10%蔗糖
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6楼2012-04-14 22:22:17
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
悠悠6690: 金币+8, ★★★很有帮助 2012-04-15 21:09:06
换成固体培养基，可能会长得更直。观察时调节显微镜，如果是从萌发孔中伸出的就是花粉管。如果只是和线一样的，可能是菌。
你可以在培养30min，1h,等不同时间观察，不一定非要等到参考文献描述的3h后。萌发前期花粉管露出小芽，有利于你判断。
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7楼2012-04-15 19:52:54
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-15 19:52:54:
换成固体培养基，可能会长得更直。观察时调节显微镜，如果是从萌发孔中伸出的就是花粉管。如果只是和线一样的，可能是菌。
你可以在培养30min，1h,等不同时间观察，不一定非要等到参考文献描述的3h后。萌发前期花 ...

呵呵，非常感谢啊！您的建议非常好，我再试一试。对了，花粉如果是椭圆的，那么是不是萌发孔都只是在两极啊？
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8楼2012-04-15 21:17:01
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by shangdee at 2012-04-16 10:58:44:
一般不是，花粉有三萌发孔，四萌发孔等多种，椭圆形三孔的萌发一般呈沟状，平行于纵轴，有点像西瓜的纹路

我拜您为师吧！
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10楼2012-04-16 14:40:00
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