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rebornpro

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求大神帮我看下我这个方案

最近要开题报告了。我要做的是筛选一个菌株,从中寻找抗肿瘤的蛋白,然后鉴定出来,再把这个基因克隆到我的宿主菌中。具体方案如下:
1、新菌株筛选;
2、发酵产物抗肿瘤活性初步鉴定;
3、抗肿瘤蛋白分离;
4、纯化的蛋白质谱鉴定;
5、设计引物扩增该蛋白的基因;
6、构建这个蛋白的表达载体;
7、表达载体导入异原宿主菌。
这个是我想的过程,不知道可行不可行,或者还要修改完善。跪求大神指点。
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rebornpro

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by j2 at 2012-04-11 20:02:29:
感觉想的挺好的,我有几个问题请教:
1 确定找得到这种新菌株?
2 用多少数据证明其分泌的蛋白有抗肿瘤活性?
3 这种蛋白还要是新发现的,以前发现了的意义就不大了
4 导入的异原宿主菌如何选择,重组菌是否就 ...

我们实验室筛了几百个土样,然后找到了几株菌,发酵后的上清对肿瘤细胞是有杀伤效果的,对正常细胞的话还没检测。是不是新的蛋白的话也还没有质谱鉴定,质谱仪实验室是有的。异源宿主菌表达的话条件肯定是要摸索的。
6楼2012-04-12 11:17:20
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 很中肯的建议啊 2012-04-11 13:49:43
这个最好还是跟你导师或者师兄师姐商量一下,毕竟别人对你们那边实验平台和实验条件不清楚啊。实验方案的确定首先要考虑的是实验条件,方案设计的再好最后发现没条件做也是白费了。而且即使你开了一个新的题,我觉得也不是全新的,至少你的前辈师兄师姐做过相关的,很多情况都是要么同种方案不同材料,要么方案不相同材料相同,要么就是延续之前的往深的做。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-04-11 10:51:40
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-14 13:37:43
感觉想的挺好的,我有几个问题请教:
1 确定找得到这种新菌株?
2 用多少数据证明其分泌的蛋白有抗肿瘤活性?
3 这种蛋白还要是新发现的,以前发现了的意义就不大了
4 导入的异原宿主菌如何选择,重组菌是否就能顺利生长并表达?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

修炼ing,当虫仙……
3楼2012-04-11 20:02:29
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要确定这种蛋白对正常细胞有无毒性  如果有毒 只能用无细胞表达系统了
4楼2012-04-11 23:49:20
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