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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求大神帮我看下我这个方案
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rebornpro

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求大神帮我看下我这个方案

最近要开题报告了。我要做的是筛选一个菌株，从中寻找抗肿瘤的蛋白，然后鉴定出来，再把这个基因克隆到我的宿主菌中。具体方案如下：
1、新菌株筛选；
2、发酵产物抗肿瘤活性初步鉴定；
3、抗肿瘤蛋白分离；
4、纯化的蛋白质谱鉴定；
5、设计引物扩增该蛋白的基因；
6、构建这个蛋白的表达载体；
7、表达载体导入异原宿主菌。
这个是我想的过程，不知道可行不可行，或者还要修改完善。跪求大神指点。
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1楼 2012-04-11 10:12:18
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 很中肯的建议啊 2012-04-11 13:49:43
这个最好还是跟你导师或者师兄师姐商量一下，毕竟别人对你们那边实验平台和实验条件不清楚啊。实验方案的确定首先要考虑的是实验条件，方案设计的再好最后发现没条件做也是白费了。而且即使你开了一个新的题，我觉得也不是全新的，至少你的前辈师兄师姐做过相关的，很多情况都是要么同种方案不同材料，要么方案不相同材料相同，要么就是延续之前的往深的做。
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rebornpro
2楼2012-04-11 10:51:40
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-14 13:37:43
感觉想的挺好的，我有几个问题请教：
1 确定找得到这种新菌株？
2 用多少数据证明其分泌的蛋白有抗肿瘤活性？
3 这种蛋白还要是新发现的，以前发现了的意义就不大了
4 导入的异原宿主菌如何选择，重组菌是否就能顺利生长并表达？
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

rebornpro
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2012-04-11 20:02:29
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要确定这种蛋白对正常细胞有无毒性  如果有毒 只能用无细胞表达系统了
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4楼2012-04-11 23:49:20
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rebornpro

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 超然渡陈 at 2012-04-11 10:51:40:
这个最好还是跟你导师或者师兄师姐商量一下，毕竟别人对你们那边实验平台和实验条件不清楚啊。实验方案的确定首先要考虑的是实验条件，方案设计的再好最后发现没条件做也是白费了。而且即使你开了一个新的题，我觉 ...

感谢你的回答，我们实验室硬件设施还是挺好的，有HPLC，质谱仪，Zeiss的共聚焦显微镜，平台是可以做这些的，方案的话我还是跟别人多讨论讨论，搞个最合理的出来。
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5楼2012-04-12 11:15:13
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rebornpro

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by j2 at 2012-04-11 20:02:29:
感觉想的挺好的，我有几个问题请教：
1 确定找得到这种新菌株？
2 用多少数据证明其分泌的蛋白有抗肿瘤活性？
3 这种蛋白还要是新发现的，以前发现了的意义就不大了
4 导入的异原宿主菌如何选择，重组菌是否就 ...

我们实验室筛了几百个土样，然后找到了几株菌，发酵后的上清对肿瘤细胞是有杀伤效果的，对正常细胞的话还没检测。是不是新的蛋白的话也还没有质谱鉴定，质谱仪实验室是有的。异源宿主菌表达的话条件肯定是要摸索的。
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6楼2012-04-12 11:17:20
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whb21

木虫 (著名写手)
不知道您是硕士还是博士，但这个题要是硕士做的话还可以毕业
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7楼2012-04-12 12:09:47
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rebornpro

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by whb21 at 2012-04-12 12:09:47:
不知道您是硕士还是博士，但这个题要是硕士做的话还可以毕业

我是硕士
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8楼2012-04-12 15:03:10
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by rebornpro at 2012-04-12 15:03:10:
我是硕士

硕士随便做点东西就毕业算了，文章也比较好发，不用担心
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9楼2012-04-12 16:25:12
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chaovt714

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的情况和我们这边差不多，我也是从新菌株入手的，可以交流下~~~154847886
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10楼2012-04-14 09:10:35
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