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beimi

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 九戒不是戒 at 2013-08-22 03:51:32
我最近也在做G蛋白偶联受体的原核表达,1个月了,一点结果都木有,我用的是载体是PET-32a,表达菌rosseta,IPTG分别0.4,0.6,0.8mM,时间10小时,15小时,温度分别20°,34°。培养基TB,分别试了加百分之2的葡萄糖和 ...

我做了半年,最后换了tag,用mbp表达的,还不错,我用的bl21,另一个据说很好的,我的表达不好,可能不同的蛋白不一样吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
11楼2013-08-22 05:19:12
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可否考虑用真核表达载体转进相应的昆虫细胞进行表达,真核表达蛋白还具有活性,对于后续的验证也是极大的方便。
成功,就是成为你想成为的人
12楼2013-08-22 08:16:00
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匿名

用户注销 (小有名气)

本帖仅楼主可见
13楼2014-08-27 16:59:39
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beimi

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by zq191236086 at 2014-08-27 16:59:39
您好,请问您的膜蛋白表达iptg的浓度时0.05mM吗?...

是的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
14楼2014-08-28 21:03:49
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yjq151632

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by beimi at 2013-01-18 07:19:40
我也是做这个的,跨莫蛋白,我是做翻译后修饰,你的iptg浓度太高了,我最多才用0.05,用哦
0。01也行,低温,段时间,我做了三个月了,快昨晚了,祝好听

你好,想请教一下,低温是多少度?多长时间?
15楼2015-01-29 20:50:00
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jjllxx

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by yjq151632 at 2015-01-29 20:50:00
你好,想请教一下,低温是多少度?多长时间?...

最后出来了么,我现在做的是5次跨膜的,不知道楼主最后怎么表达出来的
16楼2015-05-07 17:46:10
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1991jane

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 九戒不是戒 at 2013-08-22 03:51:32
我最近也在做G蛋白偶联受体的原核表达,1个月了,一点结果都木有,我用的是载体是PET-32a,表达菌rosseta,IPTG分别0.4,0.6,0.8mM,时间10小时,15小时,温度分别20°,34°。培养基TB,分别试了加百分之2的葡萄糖和 ...

最后做出来了吗?请问是什么条件?
17楼2016-03-18 11:19:15
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Tiandybest

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by yjq151632 at 2015-01-29 20:50:00
你好,想请教一下,低温是多少度?多长时间?...

请问您的条件是什么,我现在在做6次跨膜蛋白的表达,跪求

发自小木虫Android客户端
18楼2017-09-07 00:51:32
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本帖内容被屏蔽

19楼2020-09-13 13:15:22
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