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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 植物脱毒的疑惑
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欢仔

银虫 (正式写手)

[求助] 植物脱毒的疑惑

大家好 这是我最近做的叶片愈伤组织  用的是嫩叶  75醇消毒了10几秒  次氯酸钠水 泡了20秒  结果就成这样了  叶片这种状态说明了什么 考虑到叶片嫩 这个消毒时间比之前做的都短    我想知道嫩叶该怎么脱毒才不至于多度 谢谢了










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勇于尝试新鲜事物
1楼 2012-04-08 01:07:50
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

姑娘

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
SongQ5285: 金币+3, APEPI+1, 鼓励认真的应助 2012-04-08 10:19:22
其实葡萄的快繁，一般不会用叶片！！如果允许，我建议换外植体，你可以考虑用芽，芽用来快繁比较有速度，而且成活率较高！！当然也是消毒的步骤很关键。。
如果你一定要用叶子，我建议的步骤是这样，仅供参考，具体你要自己好好设计一下实验步骤和思路：：采取当年新生新梢葡萄的上部叶片， 剪成 8 ～1 0   c m的小段， 流水冲洗10  mi n （记得是流水）， 除去表面灰尘， 用 巴氏消毒液( 1：1 2 5 ) 浸泡 1 5 mi n ， 再用7 0%  的酒精和0.1 的升汞依次消毒10 S 和2mi n ， 最后用无菌水冲洗5次。

如果可以是枝条或是芽，将枝条剪成单芽茎段，用以上叶子消毒的方法消毒（但是可能升汞消毒的时间要较叶子长一点，你可以好好斟酌下！！！），最后接入 Gs培养基进行初代培养．一个月后，将获得的无菌材料转接到 MS培养基上进行继代增殖．
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6楼2012-04-08 10:17:41
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普通回帖

hncsc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
欢仔: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-08 09:37:07
1、你培养的是哪种植物嫩叶？
2、通过叶片形成愈伤组织再形成完整植株整齐较长。
3、通过茎尖、热处理、花药等途径脱毒是否更快捷一些。
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2楼2012-04-08 07:17:44
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hncsc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
欢仔: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-08 09:39:20
从叶片状态，大部分叶片组织已死亡。一般植物嫩叶用75%乙醇消毒十几秒，再用次氯酸钠水泡了20秒，时间不是太长。可能是这种植物的叶片太薄，消毒时再多进行几个消毒处理。
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3楼2012-04-08 07:22:38
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hncsc at 2012-04-08 07:17:44:
1、你培养的是哪种植物嫩叶？
2、通过叶片形成愈伤组织再形成完整植株整齐较长。
3、通过茎尖、热处理、花药等途径脱毒是否更快捷一些。

葡萄的  你说的热处理 是什么方法
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勇于尝试新鲜事物
4楼2012-04-08 09:36:55
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hncsc at 2012-04-08 07:22:38:
从叶片状态，大部分叶片组织已死亡。一般植物嫩叶用75%乙醇消毒十几秒，再用次氯酸钠水泡了20秒，时间不是太长。可能是这种植物的叶片太薄，消毒时再多进行几个消毒处理。

对于嫩叶 还有什么消毒处理的方法呀   我不是很清楚  像这种情况用什么消毒方法比较合适 谢谢
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勇于尝试新鲜事物
5楼2012-04-08 09:39:10
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曾经遥远

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
SongQ5285: 金币+2, 鼓励应助交流 2012-04-08 13:32:17
欢仔: 金币+6, ★★★很有帮助, 1 2012-04-08 19:40:39
你试试不用酒精而只用次氯酸钠看看，酒精对嫩叶杀伤力太强了。另外，有些文献也提到可以用双氧水进行灭菌，不过具体操作我也没做过。或者是使用抗生素培养基来抑制菌，对外植体的伤害小，但是也可能会对外植体生长有影响。你在做处理时都可以试一下。
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选择了就不要放弃
7楼2012-04-08 13:13:37
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 曾经遥远 at 2012-04-08 13:13:37:
你试试不用酒精而只用次氯酸钠看看，酒精对嫩叶杀伤力太强了。另外，有些文献也提到可以用双氧水进行灭菌，不过具体操作我也没做过。或者是使用抗生素培养基来抑制菌，对外植体的伤害小，但是也可能会对外植体生长 ...

恩  今天我用酒精擦叶片  不知道有效果没有 明天就知道了  
就怕染菌
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勇于尝试新鲜事物
8楼2012-04-08 19:40:31
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欢仔

银虫 (正式写手)
★ ★
SongQ5285: 金币+2, 欢迎交流 2012-04-10 19:37:31
引用回帖:
6楼: Originally posted by 姑娘 at 2012-04-08 10:17:41:
其实葡萄的快繁，一般不会用叶片！！如果允许，我建议换外植体，你可以考虑用芽，芽用来快繁比较有速度，而且成活率较高！！当然也是消毒的步骤很关键。。
如果你一定要用叶子，我建议的步骤是这样，仅供参考，具 ...

恩 现在葡萄才发芽  如果用芽做的话 很担心 葡萄都不长了
芽的脱毒是不是也很难把握呀
我现在就用75醇泡了10几秒  次氯酸钠水20几秒就成这样了
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勇于尝试新鲜事物
9楼2012-04-08 19:47:18
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟
★ ★
SongQ5285: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-10 19:37:39
建议脱毒之前先用自来水冲洗半个小时，然后相应的减少酒精和次氯酸钠的浸泡时间！
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Tobeornottobe,that'saproblem
10楼2012-04-10 19:34:24
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