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lvye3707金虫 (正式写手)
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[求助]
GV3101的抗性，合适的培养基，转化方法
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| 要做拟南芥转化，可关于GV3101的抗性，合适的培养基及浓度，和转化方法，网络上都有不同的说法。求大神指导.... |
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fungixx
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【答案】应助回帖
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lvye3707: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-04-07 18:45:19
rainwander: 金币+5, 鼓励交流 2012-04-08 09:01:05
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利福平和庆大霉素~ 培养基用YEB,我用的是电转化(参考资料在附件中) Strain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin, 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3101 is sensitive to kanamycin (or chloramphenicol), so is a good strain for use with binary vectors that confer kan resistance (or chloramphenicol resistance) in bacteria (e.g. transformed cells will be Gent, rif and Kan resistant). GV3101 carries a disarmed Ti plasmid that possesses the vir genes needed for T-DNA transfer, but has no functional T-DNA region of its own. Grow at 28-30°C. Store as glycerol stock (800 ml of fresh overnight culture + 200 ul sterile 80% glycerol) at ¬80°C. |
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2012-04-07 17:56:48, 49.5 K
2楼2012-04-07 17:57:34