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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 鸟苷鸟嘌呤的HPLC分析

鸟苷跟鸟嘌呤的磷酸缓冲液中加入了三氯乙酸,跟标准品比较,高效液相保留时间发生明显变化,是不是鸟苷及鸟嘌呤跟三氯乙酸反应导致极性变化引起的呢,假如是这样,跟标准品对比,保留时间应该是怎样变化的呢?
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痴夷子皮

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不一定是反应,加入了三氯乙酸,流动相组分、pH发生变化,对于酸碱性样品,保留时间会发生变化。
守候在风中的宁静。
2楼2012-04-06 14:38:33
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-06 14:38:33:
不一定是反应,加入了三氯乙酸,流动相组分、pH发生变化,对于酸碱性样品,保留时间会发生变化。

三氯乙酸是加到了反应液里面,也就是样品里,用于终止反应的,不是加到洗脱液里面啊,进样10μl对保留时间会有那么大的影响吗,谢谢
3楼2012-04-06 14:46:52
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痴夷子皮

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引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2012-04-06 14:46:52:
三氯乙酸是加到了反应液里面,也就是样品里,用于终止反应的,不是加到洗脱液里面啊,进样10μl对保留时间会有那么大的影响吗,谢谢

哦,我理解错了。反应液中,影响不大。
保留时间的变化,和极性变化有关,如果极性变大,保留时间缩短,反之延长。
守候在风中的宁静。
4楼2012-04-06 14:53:41
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-06 14:53:41:
哦,我理解错了。反应液中,影响不大。
保留时间的变化,和极性变化有关,如果极性变大,保留时间缩短,反之延长。

谢谢指导
5楼2012-04-08 20:29:41
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