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xifu521

新虫 (初入文坛)

[求助] Tris-Tricine SDS PAGE 电泳为何只跑出了marker?

昨天跑了一个Tris-Tricine SDS PAGE,marker是超低分子量(6个条带),分离胶浓度10%,上样后,开始30V 后来150V跑电泳,考马斯亮蓝染色,结果最后只出来了marker 条带,而且只有前四条,后面分子量4000左右和1016的低分子条带没有跑出来。
我自己分析了原因,可能是分离胶浓度低了,导致marker没有跑出来,但是样品上样量中蛋白质含量符合上样标准,为什么跑不出来呢?还有Marker没有跑全的原因还有别的吗?
谢谢大家看贴,虚心请教!

[ Last edited by xinmor on 2012-5-22 at 11:24 ]
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xifu521

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by rhguo at 2012-05-09 20:35:05:
上个图吧,我也在做这个,30v要跑多久,我直接80v,然后150不知道能不能跑出来

一开始80V有点高了, 30V跑到溴酚蓝落到分离胶开始 加电压到120-150V左右,而且高电压跑的时候建议加冰袋在旁边冷敷,否则温度过高 胶有可能融化
17楼2012-05-10 10:41:57
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tuobaohua

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【答案】应助回帖


wenjing120: 金币+1, 华哥加油 2012-04-03 18:04:21
会不会是时间跑久了把Marker给跑出去了?

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2楼2012-04-03 08:23:56
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lxmzhj1984

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wenjing120: 金币+1, 鼓励交流!欢迎常来科研版! 2012-04-03 18:03:55
marker有时候是有问题的,我们实验室也是在公司买的marker,上面画的是10条带,但是最下面的两条带就是跑不出来,这个不用管,只要能确定你的蛋白大小就行了哦

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继续拼搏!
3楼2012-04-03 16:02:14
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xifu521

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by tuobaohua at 2012-04-03 08:23:56:
会不会是时间跑久了把Marker给跑出去了?

有这个可能 但是不知道为什么样品没有跑出来
4楼2012-04-04 20:40:12
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