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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 做过多糖除蛋白的请进
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zhxl81920

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-04-08 09:23:07
引用回帖:
10楼: Originally posted by 七AND七 at 2012-04-05 19:09:26:
你好！加了Sevag试剂后是用搅拌子搅拌么 不用在分液漏斗中剧烈振摇么？我振摇了之后呈白色状态，我想是乳化了。然后我又去离心看看，结果就只有两层（上层多糖，下层就全部是白色的）没看到所谓的变性蛋白。搅拌 ...

该方法对多糖的损失很厉害，一般搅拌30min，需要7-9次效果较佳。酶解后蛋白降解为小肽或者氨基酸，选择合适大小的透析袋是可以去掉的。另外可以尝试732阳离子交换树脂。
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又是美好的一天
11楼2012-04-06 08:48:57
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guoheizi

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 七AND七 at 2012-04-05 19:09:26:
你好！加了Sevag试剂后是用搅拌子搅拌么 不用在分液漏斗中剧烈振摇么？我振摇了之后呈白色状态，我想是乳化了。然后我又去离心看看，结果就只有两层（上层多糖，下层就全部是白色的）没看到所谓的变性蛋白。搅拌 ...

你初次除蛋白时蛋白的含量会相对较多，即使你离心了也会看到氯仿层会是黏黏的，等到你除几次以后渐渐的变性蛋白就少了 就会在离心完后看到薄薄的一层白色粘稠物质。加水饱和正丁醇就是为了防止乳化的。建议你氯仿和水饱和正丁醇4:1 然后糖溶液和有机相体积比1:1 在最初除蛋白的几次可以用磁力搅拌器之类的 等到搅拌三四次以后换手动摇瓶。这样省力气啊孩子。呵呵
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12楼2012-04-08 00:32:42
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zhh0011

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我之前也做过跟你的现象是一样的，后来又做了几次，发现现象是正常的，也不知道怎么回事
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13楼2012-05-10 09:42:16
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ningda47

金虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by guoheizi at 2012-04-08 00:32:42:
你初次除蛋白时蛋白的含量会相对较多，即使你离心了也会看到氯仿层会是黏黏的，等到你除几次以后渐渐的变性蛋白就少了 就会在离心完后看到薄薄的一层白色粘稠物质。加水饱和正丁醇就是为了防止乳化的。建议你氯仿 ...

我离心以后，开始两次也是两个层，上面水层，下面全乳白色，后面的就成三层了，上面水层，中间白色的，下面是氯仿层，我每次只要上面的，请问这样做合适不
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路是自己选的，就是爬着也得到终点，坚持、加油！
14楼2012-05-10 10:04:32
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jj_ws

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
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7楼: Originally posted by wonder1986 at 2012-04-05 09:59:21
有机溶剂是在下层吗？我用sevag试剂怎么是有机溶剂在上层啊~~...

亲，请问下你做的时候有机相是透明的吗？我的有机相呈淡黄色？我多糖的颜色是淡黄色，想问一下有机相是不是含多糖啊？
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cherry-cherish
15楼2012-07-17 15:35:17
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七AND七

银虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by jj_ws at 2012-07-17 15:35:17
亲，请问下你做的时候有机相是透明的吗？我的有机相呈淡黄色？我多糖的颜色是淡黄色，想问一下有机相是不是含多糖啊？...

可能是一些色素吧
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16楼2012-07-17 15:38:12
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jj_ws

金虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by 七AND七 at 2012-07-17 15:38:12
可能是一些色素吧...

我今天做的时候只出现了两层，一层是白色沉淀在上层，另一层就是有机层了，水相层为什么没有了呢
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cherry-cherish
17楼2012-07-17 15:40:42
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七小艾

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
求助楼主啊
我在做海藻多糖提取，可是微波提取以后直接成了果冻状，没办法抽滤，也没办法测多糖含量，该怎么办啊？？
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18楼2012-10-13 19:32:40
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星辰89

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你把多糖溶液调稀点，而且放在分液漏斗中静置之后用吸管把上层的多糖溶液给吸出来，不要用分液漏斗分。我做的时候就是这样的~多糖肯定会有很多损失的，这个没法儿避免的~
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放弃了的就绝不再捡！
19楼2012-10-22 20:06:45
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即墨络绎

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by wonder1986 at 2012-04-05 09:59:21
有机溶剂是在下层吗？我用sevag试剂怎么是有机溶剂在上层啊~~...

应该是Sevag试剂配比错了！
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20楼2013-04-27 22:39:00
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