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sun880806

铜虫 (小有名气)

[求助] 请教一个测肽的 问题

我要测蛋白酶解液中的肽含量,先用TCA沉淀,再用双缩脲法测肽,540nm比色,还算顺利。但是我的酶解液本身是有颜色的,怀疑有一些黄酮。这会不会影响测定结果啊?如果有影响,有什么方法能消除这种影响呢?求高人解答
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小硕
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covichen

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有颜色的一半会影响,你使用紫外分光光度法,有颜色会吸收
2楼2012-04-02 19:32:43
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我个人建议你测定前绘制标准曲线,这样测定准确度高。
3楼2012-04-02 21:56:18
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ssdghf

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


hsd3521: 金币+1, 感谢提供建议 2012-05-16 22:12:08
如果你怀疑颜色影响的话,可以换个方法啊——凯氏定氮。也是用TCA先沉淀蛋白,取上清液,测定其中氮含量,再转化成你的肽的浓度就可以了。
4楼2012-05-15 18:57:44
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