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pharma1309

新虫 (正式写手)

[求助] Ki67的组化一直做的都不是很好！！！

Ki67的组化一直做的都不是很好，特异性的染色很淡，背景较高，把步骤贴出来，请大家帮帮忙！
1、肠道石蜡切片脱蜡至水
2、PH6.0的柠檬酸钠抗原修复20Min
3、PBS洗一遍，3%过氧化氢30min
4、5%BSA封闭30min
5、Ki67一抗（abcam,1:100）4℃ 20小时，洗净
6、二抗（pierce,1:2000)室温 2小时，洗净
7、抗生物素蛋白-生物素-过氧化酶复合物（ABC）作用1小时，洗净
8、DAB显色
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Nevertoforgetinmylife~
1楼 2012-03-30 19:44:20
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流浪星

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pharma1309: 金币+2, ★有帮助 2012-03-31 23:27:08
个人觉得与一抗和二抗有很大关系
使用较好厂家的，费用贵一些，结果可能会好一些
你也可以尝试联系一下现在的生产商，把片子寄过去让她们自己做，看染色如何，如果她们做的也不行，那么就必须更换了
赞一下(1人) 回复此楼
一生只流两行泪，半为苍生半美人
2楼2012-03-31 01:25:11
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pharma1309

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 流浪星 at 2012-03-31 01:25:11:
个人觉得与一抗和二抗有很大关系
使用较好厂家的，费用贵一些，结果可能会好一些
你也可以尝试联系一下现在的生产商，把片子寄过去让她们自己做，看染色如何，如果她们做的也不行，那么就必须更换了

谢谢~~~~~~~~~~~
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Nevertoforgetinmylife~
3楼2012-03-31 23:25:30
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