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pharma1309

新虫 (正式写手)

[求助] Ki67的组化一直做的都不是很好!!!

Ki67的组化一直做的都不是很好,特异性的染色很淡,背景较高,把步骤贴出来,请大家帮帮忙!
1、肠道石蜡切片脱蜡至水
2、PH6.0的柠檬酸钠抗原修复20Min
3、PBS洗一遍,3%过氧化氢30min
4、5%BSA封闭30min
5、Ki67一抗(abcam,1:100)4℃ 20小时,洗净
6、二抗(pierce,1:2000)室温 2小时,洗净
7、抗生物素蛋白-生物素-过氧化酶复合物(ABC)作用1小时,洗净
8、DAB显色
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Nevertoforgetinmylife~
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流浪星

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
pharma1309: 金币+2, 有帮助 2012-03-31 23:27:08
个人觉得与一抗和二抗有很大关系
使用较好厂家的,费用贵一些,结果可能会好一些
你也可以尝试联系一下现在的生产商,把片子寄过去让她们自己做,看染色如何,如果她们做的也不行,那么就必须更换了
一生只流两行泪,半为苍生半美人
2楼2012-03-31 01:25:11
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pharma1309

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 流浪星 at 2012-03-31 01:25:11:
个人觉得与一抗和二抗有很大关系
使用较好厂家的,费用贵一些,结果可能会好一些
你也可以尝试联系一下现在的生产商,把片子寄过去让她们自己做,看染色如何,如果她们做的也不行,那么就必须更换了

谢谢~~~~~~~~~~~
Nevertoforgetinmylife~
3楼2012-03-31 23:25:30
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